(57) 1. Мутантный v3 (вариант 3) или v2 (вариант 2) белка, связывающего фактор Н (fHbp), представляющий собой:
(А) полипептид, содержащий мутантную аминокислотную последовательность fHbp v2, где
(1) аминокислотная последовательность имеет по меньшей мере 80% идентичность последовательности SEQ ID NO: 5 и/или содержит фрагмент SEQ ID NO: 5, длина которого составляет по меньшей мере 7 аминокислот и который включает остаток, соответствующий остатку S32 из SEQ ID NO: 5; но
(2) эта аминокислотная последовательность отличается от SEQ ID NO: 5 по остатку S32 заменой S32V;
или
(Б) полипептид, содержащий мутантную аминокислотную последовательность fHbp v3, где
(1) аминокислотная последовательность обладает по меньшей мере 80% идентичностью последовательности SEQ ID NO: 17 и/или содержит фрагмент SEQ ID NO: 17, длина которого составляет по меньшей мере 7 аминокислот и который включает остаток, соответствующий остатку S32 из SEQ ID NO: 17; но
(2) эта аминокислотная последовательность отличается от SEQ ID NO: 17 по остатку S32 заменой S32V.
2. Полипептид по п.1, где
(А) аминокислотная последовательность дополнительно отличается от SEQ ID NO: 5 заменой по одному или более из L123, V124, S125, G126, L127 и/или G128, где замена(ы) выбрана(ы) из группы, состоящей из L123R; V124I; S125G или S125T; G126D; L127I; G128A; или
(Б) аминокислотная последовательность дополнительно отличается от SEQ ID NO: 17 заменой по L126, где замена представляет собой L126R.
3. Полипептид по п.1(А), содержащий замены по множеству остатков относительно SEQ ID NO: 5, которые выбраны из групп 2Б, 2И, 2К или 2П следующим образом:
2Б: остатки 32 и 123;
2И: остатки S32V и S125G или S125T;
2К: остатки S32V, L123R и S125G или
2П: остатки S32V, L123R, V124I, S125G, G126D, L127I и G128A.
4. Полипептид по любому из пп.1-3, также включающий одну или более дополнительную(ые) мутацию(и), которая(ые) нарушает(ют) способность полипептида связываться с человеческим фактором H, такой как v2, включающий замену по одному или более чем одному из остатков R73, D203, Е210, G228, S121, F122, А192, Е194, V199, I200, L201, Т213, Н215, F219, Т231 и Е240, или v3, включающий замену по одному или более чем одному из остатков Q35, I178, L87, А88, V127, V202, Е213, Т216, Н218, Т234, V241, Е243 и G248.
5. Полипептид, содержащий
аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 45, не содержащую или содержащую 1, 2, 3, 4 или 5 единичных аминокислотных замен, делеций и/или вставок, где полипептид может вызывать образование антител, которые связываются с менингококковым полипептидом fHbp, состоящим из аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 2, но не имеющую мутации по остатку V32 или R123;
аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 44, не содержащую или содержащую 1, 2, 3, 4 или 5 единичных аминокислотных замен, делеций и/или вставок, где полипептид может вызывать образование антител, которые связываются с менингококковым полипептидом fHbp, состоящим из аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 40, но не имеющую мутации по остатку V32 или R126;
аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 58, не содержащую или содержащую 1, 2, 3, 4 или 5 единичных аминокислотных замен, делеций и/или вставок, где полипептид может вызывать образование антител, которые связываются с менингококковым полипептидом fHbp, состоящим из аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 2, но не имеющую мутации по остатку V32;
аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 61, не содержащую или содержащую 1, 2, 3, 4 или 5 единичных аминокислотных замен, делеций и/или вставок, где полипептид может вызывать образование антител, которые связываются с менингококковым полипептидом fHbp, состоящим из аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 2, но не имеющую мутации по остатку V32;
аминокислотную последовательность fHbp v3, которая идентична аминокислотной последовательности v3 дикого типа, за исключением мутации по аминокислотному положению, соответствующему Leu-126 в SEQ ID NO: 17, при условии, что мутация не представляет собой замену на аланин;
аминокислотную последовательность fHbp v2, которая идентична аминокислотной последовательности v2 дикого типа, за исключением мутации по аминокислотному положению, соответствующему Leu-123 в SEQ ID NO: 5, при условии, что мутация не представляет собой замену на аланин; или
аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 47, не содержащую или содержащую 1, 2, 3, 4 или 5 единичных аминокислотных замен, делеций и/или вставок, где полипептид может вызывать образование антител, которые связываются с каждым из следующих: менингококковым полипептидом fHbp, состоящим из аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 46; менингококковым полипептидом fHbp, состоящим из аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 4; и менингококковым полипептидом fHbp, состоящим из аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 40.
6. Полипептид по п.5, содержащий
аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 45 с 1, 2 или 3 единичными аминокислотными заменами, но не имеющую мутации по остатку V32 или R123;
аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 44 с 1, 2 или 3 единичными аминокислотными заменами, но не имеющую мутации по остатку V32 или R126;
аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 58 с 1, 2 или 3 единичными аминокислотными заменами, но не имеющую мутации по остатку V32; или
аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 61 с 1, 2 или 3 единичными аминокислотными заменами, но не имеющую мутации по остатку V32.
7. Полипептид по п.5, содержащий
аминокислотную последовательность fHbp v3 дикого типа, где мутация по аминокислотному положению, соответствующему Leu-126 в SEQ ID NO: 17, представляет собой замену на аргинин; или
аминокислотную последовательность fHbp v2 дикого типа, где мутация по аминокислотному положению, соответствующему Leu-123 в SEQ ID NO: 5, представляет собой замену на аргинин.
8. Полипептид по п.5, содержащий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 47, не содержащую или содержащую 1, 2, 3, 4 или 5 единичных аминокислотных замен, делеций и/или вставок, где полипептид может вызывать образование антител, которые связываются с менингококковым полипептидом fHbp, состоящим из аминокислотной последовательности SEQ ID NO: 48.
9. Плазмида или другая нуклеиновая кислота, содержащая нуклеотидную последовательность, кодирующую полипептид по любому из пп.1-8.
10. Клетка-хозяин, трансформированная плазмидой по п.9.
11. Клетка-хозяин по п.10, представляющая собой бактерию менингококк, такую как бактерия менингококк, имеющая понижающую регуляцию или нокаут гена mltA.
12. Клетка-хозяин по п.11, имеющая понижающую регуляцию или нокаут (1) по меньшей мере одного гена, участвующего в придании токсичности фрагменту липида А в липополисахариде (LPS), в частности lpxl1; и/или (2) по меньшей мере одного гена, участвующего в синтезе или экспорте капсульного полисахарида, в частности synX и/или ctrA.
13. Мембранные везикулы, полученные из клетки-хозяина по п.10 или 11, которые включают полипептид по любому из пп.1-8.
14. Композиция для иммунизации против инфекции, вызванной Neisseria, содержащая полипептид по любому из пп.1-8 или везикулу по п.13.
15. Композиция по п.14, дополнительно содержащая второй полипептид, который при введении млекопитающему вызывает ответ в виде антител, которые являются бактерицидными в отношении менингококка.
16. Композиция по п.14 или 15, дополнительно содержащая (1) конъюгированный капсульный сахарид из N.meningitidis серогруппы A, C, W135 и/или Y и/или (2) конъюгированный капсульный сахарид из S.pneumoniae.
17. Способ индукции антительного ответа у млекопитающего, включающий введение иммуногенной композиции по любому из пп.14-16.

---