Евразийский сервер публикаций

Евразийский патент № 039590

   Библиографические данные
(11)039590    (13) B1
(21)201791414

 A ]   B ]   C ]   D ]   E ]   F ]   G ]   H ] 

Текущий раздел:      


Документ опубликован 2022.02.14
Текущий бюллетень: 2022-02  
Все публикации: 039590  
Реестр евразийского патента: 039590  

(22)2015.12.23
(51) C12N 15/82 (2006.01)
C12N 15/29 (2006.01)
C07K 14/415 (2006.01)
A01H 1/08 (2006.01)
A01H 5/00 (2006.01)
A01H 5/06 (2006.01)
A01H 5/10(2006.01)
(43)A1 2018.02.28 Бюллетень № 02  тит.лист, описание 
(45)B1 2022.02.14 Бюллетень № 02  тит.лист, описание  последовательности 
(31)14004389.4
(32)2014.12.23
(33)EP
(86)EP2015/081158
(87)2016/102665 2016.06.30
(71)КВС ЗААТ СЕ (DE)
(72)Болдуан Кристоф, Бройер Франк, Клойбер-Майтц Моника, Ниссен Маркус, Оузунова Милена, Шульц Бритта, Викхорст Силке (DE)
(73)КВС ЗААТ СЕ (DE)
(74)Вашук Т.В., Емельянова В.А., Королева С.В. (BY)
(54)ГАПЛОИДНЫЙ ИНДУКТОР
   Формула 
(57) 1. Растение, обладающее биологической активностью гаплоидного индуктора и содержащее полинуклеотид, включающий нуклеотидную последовательность, кодирующую центромерный гистоновый H3 (CENH3) белок, характеризующееся тем, что полинуклеотид содержит по меньшей мере одну мутацию, вызывающую изменение аминокислотной последовательности белка CENH3 в N-терминальном хвостовом домене, соответствующем нуклеотидам в положении 1-246 последовательности SEQ ID NO. 10 белка CENH3 из Arabidopsis thaliana, приведенного в SEQ ID NO. 11,
причём указанное изменение является заменой от 1 до 7 аминокислот, выбранных из группы, включающей:
i) аргинин в положении 3 последовательности SEQ ID NO. 1 заменен на лизин, или
ii) аргинин в положении 2 последовательности SEQ ID NO. 23 заменен на лизин, либо
iii) аргинин в положении 10 последовательности SEQ ID NO. 1 заменен на фенилаланин, либо
iv) серин в положении 9 последовательности SEQ ID NO. 14 заменен на фенилаланин, либо
v) аргинин в положении 16 последовательности SEQ ID NO. 14 заменен на глутамин, либо
vi) серин в положении 24 последовательности SEQ ID NO. 14 заменен на лейцин, либо
vii) аланин в положении 25 последовательности SEQ ID NO. 17 заменен на треонин, либо
viii) глутаминовая кислота в положении 29 последовательности SEQ ID NO. 14 заменена на лизин, либо
ix) глицин в положении 30 последовательности SEQ ID NO. 14 заменен на аспарагиновую кислоту, либо
x) аланин в положении 33 последовательности SEQ ID NO. 14 или положении 32 последовательности SEQ ID NO. 20 заменен на треонин, либо
xi) пролин в положении 35 последовательности SEQ ID NO. 14 заменен на лейцин, либо
xii) глутаминовая кислота в положении 35 последовательности SEQ ID NO. 20 заменена на лизин, либо
xiii) серин в положении 41 последовательности SEQ ID NO. 14 заменен на аспарагин, либо
xiv) глицин в положении 43 последовательности SEQ ID NO. 14 заменен на глутаминовую кислоту, либо
xv) пролин в положении 50 последовательности SEQ ID NO. 14 заменен на серин, либо
xvi) пролин в положении 55 последовательности SEQ ID NO. 14 заменен на лейцин, либо
xvii) глицин в положении 57 последовательности SEQ ID NO. 14 заменен на аспарагиновую кислоту, либо
xviii) глицин в положении 61 последовательности SEQ ID NO. 14 заменен на глутаминовую кислоту, либо
xix) аргинин в положении 65 последовательности SEQ ID NO. 14 заменен на глутамин, либо
хх) аргинин в положении 65 последовательности SEQ ID NO. 14 заменен на стоп-сигнал, либо
xxi) пролин в положении 71 последовательности SEQ ID NO. 14 заменен на серин, либо
xxii) аспарагиновая кислота в положении 46 последовательности SEQ ID NO. 23 заменена на аспарагин или глицин, либо
xxiii) лизин в положении 7 последовательности SEQ ID NO. 2 заменен на серин, либо
xxiv) пролин в положении 56 последовательности SEQ ID NO. 20 заменен на серин, либо
xxv) пролин в положении 14 последовательности SEQ ID NO. 2 заменен на валин, либо
xxvi) аланин в положении 62 последовательности SEQ ID NO. 17 заменен на валин,
и причём указанное изменение придает растению биологическую активность гаплоидного индуктора.
2. Растение по п.1, отличающееся тем, что полинуклеотид, содержащий по меньшей мере одну мутацию, представляет собой эндогенный ген.
3. Часть растения по любому из предшествующих пунктов.
4. Часть растения по п.3, которая представляет собой вегетативный орган побега, корень, цветок или цветковый орган, семя, плод, семязачаток, зародыш, растительную ткань или растительную клетку.
5. Способ создания гаплоидного растения, включающий стадии:
a) скрещивание растения по пп.1, 2 с растением, экспрессирующим белок CENH3 дикого типа, и
b) идентификация гаплоидного потомства растения, получаемого на стадии скрещивания.
6. Способ создания удвоенного гаплоидного растения, включающий стадии:
a) скрещивание растения по пп.1, 2 с растением, экспрессирующим белок CENH3 дикого типа,
b) идентификация гаплоидного потомства растения, получаемого на стадии скрещивания, и
c) перевод гаплоидного растения в удвоенный гаплоид.
7. Способ по п.6, отличающийся тем, что в стадии с) гаплоидное растение переводится в удвоенный гаплоид путем обработки колхицином или посредством спонтанного удвоения хромосом.
8. Способ замены цитоплазмы растения, включающий стадии:
x) скрещивание растения по пп.1, 2 в качестве материнского родителя с растением, экспрессирующим белок CENH3 дикого типа, в качестве отцовского родителя,
y) получение гаплоидного потомства растения, содержащего хромосомы отцовского родителя и цитоплазму материнского родителя.
9. Способ создания растения по пп.1, 2, включающий стадии:
i) обработка семян растения эффективным количеством мутагена для получения растений M1,
ii) обеспечение производства фертильных растений M2,
iii) выделение геномной ДНК из растений M2 и
iv) отбор растений, содержащих по меньшей мере одну мутацию в полинуклеотиде, включающем нуклеотидную последовательность, кодирующую центромерный гистоновый H3 (CENH3) белок, где по меньшей мере одна мутация вызывает изменение аминокислотной последовательности белка CENH3 в N-терминальном хвостовом домене, соответствующем нуклеотидам в положении 1-246 последовательности SEQ ID NO. 10 белка CENH3 из Arabidopsis thaliana последовательности SEQ ID NO. 11,
где по меньшей мере одна мутация вызывает замену от 1 до 7 аминокислот, выбранных из группы, включающей:
v) аргинин в положении 3 последовательности SEQ ID NO. 1 заменен на лизин, или
vi) аргинин в положении 2 последовательности SEQ ID NO. 23 заменен на лизин, либо
vii) аргинин в положении 10 последовательности SEQ ID NO. 1 заменен на фенилаланин, либо
viii) серин в положении 9 последовательности SEQ ID NO. 14 заменен на фенилаланин, либо
ix) аргинин в положении 16 последовательности SEQ ID NO. 14 заменен на глутамин, либо
х) серин в положении 24 последовательности SEQ ID NO. 14 заменен на лейцин, либо
xi) аланин в положении 25 последовательности SEQ ID NO. 17 заменен на треонин, либо
xii) глутаминовая кислота в положении 29 последовательности SEQ ID NO. 14 заменена на лизин, либо
xiii) глицин в положении 30 последовательности SEQ ID NO. 14 заменен на аспарагиновую кислоту, либо
xiv) аланин в положении 33 последовательности SEQ ID NO. 14 или положении 32 последовательности SEQ ID NO. 20 заменен на треонин, либо
xv) пролин в положении 35 последовательности SEQ ID NO. 14 заменен на лейцин, либо
xvi) глутаминовая кислота в положении 35 последовательности SEQ ID NO. 20 заменена на лизин, либо
xvii) серин в положении 41 последовательности SEQ ID NO. 14 заменен на аспарагин, либо
xviii) глицин в положении 43 последовательности SEQ ID NO. 14 заменен на глутаминовую кислоту, либо
xix) пролин в положении 50 последовательности SEQ ID NO. 14 заменен на серин, либо
хх) пролин в положении 55 последовательности SEQ ID NO. 14 заменен на лейцин, либо
xxi) глицин в положении 57 последовательности SEQ ID NO. 14 заменен на аспарагиновую кислоту, либо
xxii) глицин в положении 61 последовательности SEQ ID NO. 14 заменен на глутаминовую кислоту, либо
xxiii) аргинин в положении 65 последовательности SEQ ID NO. 14 заменен на глутамин, либо
xxiv) аргинин в положении 65 последовательности SEQ ID NO. 14 заменен на стоп-сигнал, либо
xxv) пролин в положении 71 последовательности SEQ ID NO. 14 заменен на серин, либо
xxvi) аспарагиновая кислота в положении 46 последовательности SEQ ID NO. 23 заменена на аспарагин или глицин, либо
xxvii) лизин в положении 7 последовательности SEQ ID NO. 2 заменен на серин, либо
xxviii) пролин в положении 56 последовательности SEQ ID NO. 20 заменен на серин, либо
xxix) пролин в положении 14 последовательности SEQ ID NO. 2 заменен на валин, либо
ххх) аланин в положении 62 последовательности SEQ ID NO. 17 заменен на валин.
10. Способ создания растения по п.9, отличающийся тем, что в качестве мутагена используется этилметансульфонат.
11. Способ создания растения по пп.1, 2, включающий стадии:
yy) трансформация растительной клетки путём введения полинуклеотида, раскрытого в п.1, или вектора, содержащего указанный полинуклеотид, и
zz) регенерация растения, обладающего биологической активностью гаплоидного индуктора, из растительной клетки.