Евразийский сервер публикаций

Евразийский патент № 040607

   Библиографические данные
(11)040607    (13) B1
(21)201400709

 A ]   B ]   C ]   D ]   E ]   F ]   G ]   H ] 

Текущий раздел: C     


Документ опубликован 2022.07.05
Текущий бюллетень: 2022-07  
Все публикации: 040607  
Реестр евразийского патента: 040607  

(22)2012.11.12
(51) C07K 16/28 (2006.01)
C07K 16/30 (2006.01)
C07K 16/46(2006.01)
(43)A1 2016.08.31 Бюллетень № 08  тит.лист, описание 
(45)B1 2022.07.05 Бюллетень № 07  тит.лист, описание 
(31)61/577,327
(32)2011.12.19
(33)US
(86)EP2012/072364
(87)2013/092001 2013.06.27
(71)СИНИММУН ГМБХ (DE)
(72)Янг Гундрам, Дурбен Михаэл, Гросс-Ховест Лудгер (DE)
(73)СИНИММУН ГМБХ (DE)
(74)Поликарпов А.В., Соколова М.В., Черкас Д.А., Игнатьев А.В., Путинцев А.И., Билык А.В., Дмитриев А.В. (RU)
(54)МОЛЕКУЛА БИСПЕЦИФИЧЕСКОГО АНТИТЕЛА
   Формула 
(57) 1. Рекомбинантная молекула биспецифического антитела, характеризующаяся тем, что включает Fab-фрагмент, содержащий первый сайт связывания первого антигена, одноцепочечный Fv-фрагмент, содержащий второй сайт связывания для второго антигена, и СН2-домен иммуноглобулина IgG1,
при этом Fab-фрагмент и одноцепочечный Fv-фрагмент связаны через СН2-домен,
причем по меньшей мере три аминокислотных остатка СН2-домена, обладающие способностью обеспечивать связывание с Fc-рецепторами, удалены или мутированы путем замены на другую аминокислоту, тем самым ослабляя связывание СН2-домена к Fc-рецепторам,
причем по меньшей мере три аминокислотных остатка СН2-домена состоят из положения последовательности 233 и по меньшей мере двух аминокислот, выбранных из группы, состоящей из положения последовательности 228, 230, 231, 232, 234, 235, 236, 237, 238, 265, 297, 327 и 330 (нумерация положений последовательностей в соответствии с номенклатурой ЕС), где, кроме того, аминокислотные остатки в положениях 226 и 229 удалены или мутированы посредством замены на другую аминокислоту, где либо первый сайт связывания, либо второй сайт связывания связывается с антигеном, ассоциированным с опухолью, и где первый сайт связывания или второй сайт связывания связывается с молекулой специфического рецептора Т-клетки или NK-клетки.
2. Молекула антитела по п.1, характеризующаяся тем, что ассоциированный с опухолью антиген выбран из группы, включающей CD10, CD19, CD20, CD21, CD22, CD25, CD30, CD33, CD34, CD37, CD44v6, CD45, CDw52, Fms-подобной тирозинкиназы 3 (FLT-3, CD135), c-Kit (протеин-рецепторной тирозинкиназы, продукт гена KIT) (CD117), CSF1R (CD115), CD133, PDGFR-a (CD140a), PDGFR-b (CD140b), хондроитинсульфат протеогликана 4 (CSPG4, меланома-ассоциированный хондроитинсульфат протеогликана), Muc-1, EGFR, de2-7-EGFR, EGFRvIII, фолатсвязывающий белок, Her2/neu, Her3, PSMA, PSCA, PSA, TAG-72, HLA-DR, IGFR, CD133, IL3R, белок, активирующий фибробласты (FAP), карбоангидраза IX (MN/CA IX), карциноэмбриональный антиген (СЕА), ЕрСАМ, CDCP1, Derlin1, тенасцин, Frizzled 1-10, сосудистые антигены VEGFR2 (KDR/FLK1), VEGFR3 (FLT4, CD309), эндоглин, CLEC14, Tem1-8 и Tie2; и/или либо первый сайт связывания, либо второй сайт связывания связывает молекулу специфического рецептора Т-клеток или NK-клеток, которая является одной из нижеуказанных: CD3, TCR (рецептор Т-клеток), CD28, CD16, NKG2D, Ox40, 4-1BB, CD2, CD5 и CD95, при этом TCR представляет собой TCR (альфа/бета) или TCR (гамма/дельта).
3. Молекула антитела по п.1 или 2, в которой Fab-фрагмент связан с СН2-доменом через CH1- и VH-домены тяжелой цепи Fab-фрагмента или через CL- и VL-домены легкой цепи Fab-фрагмента,
при этом домены тяжелой цепи Fab-фрагмента или домены легкой цепи Fab-фрагмента расположены на N-конце данной молекулы антитела, где СН2-домен связан с scFv-фрагментом через вариабельный домен легкой цепи (домен VL) scFv-фрагмента, содержащий второй сайт связывания, или через вариабельный домен тяжелой цепи (домен VH) scFv-фрагмента, который содержит второй сайт связывания, или Fab-фрагмент, который содержит первый сайт связывания для первого антигена, состоит из VL-домена, слитого с CH1-доменом, и VH-домена, объединенного с CL-доменом,
причем CH1-домен Fab-фрагмента объединен с СН2-доменом и/или VL-CH1-цепь Fab-фрагмента расположена на N-конце молекулы антитела.
4. Молекула антитела по любому из предшествующих пунктов, в которой Fab-фрагмент включает шарнирный участок, при этом первый сайт связывания связывает ассоциированный с опухолью поверхностный антиген, а второй сайт связывания связывает один из следующих элементов: CD3, Т-клеточный рецептор (TCR), CD28, CD16, NKG2D, Ox40, 4-1ВВ, CD2, CD5 и CD95.
5. Молекула антитела по любому из предшествующих пунктов, которая содержит по меньшей мере одну мутацию, выбранную из группы, включающей удаление аминокислоты 228, удаление аминокислоты 229, удаление аминокислоты 230, удаление аминокислоты 231, удаление аминокислоты 232, удаление аминокислоты 233, замену Glu233®Pro, замену Leu234®Val, удаление аминокислоты 234, замену Leu235®Ala, удаление аминокислоты 235, удаление аминокислоты 236, удаление аминокислоты 237, удаление аминокислоты 238, замену Asp265®Gly, замену Asn297®Gln, замену Ala327®Gln и замену Ala330®Ser.
6. Лекарственный препарат для лечения пролиферативной патологии, содержащий в своем составе молекулу антитела по любому из предыдущих пунктов.
7. Применение молекулы антитела по пп.1-5 для терапии пролиферативной патологии, которая выбраны из группы, включающей гемопоэтические злокачественные новообразования, такие как острые и хронические, миелоидные и лимфатические лейкозы, лимфомы, а также твердые опухоли, такие как опухоли желудочно-кишечного тракта, легких, почек, простаты, молочной железы, мозга, яичников, матки, мезенхимальные опухоли и меланома.
8. Молекула нуклеиновой кислоты, кодирующая молекулу антитела по любому из пп.1-5.
9. Вектор, содержащий молекулу нуклеиновой кислоты по п.8 для экспрессии данной молекулы нуклеиновой кислоты.
10. Клетка-хозяин, содержащая молекулу нуклеиновой кислоты по п.8 или вектор по п.9.
11. Способ продуцирования молекулы антитела по любому из пп.1-5, включающий экспрессию молекулы нуклеиновой кислоты, кодирующей молекулу антитела, в условиях, допускающих экспрессию данной нуклеиновой кислоты, при этом молекула антитела экспрессируется в клетке-хозяине или в бесклеточной системе.