Евразийский сервер публикаций

Евразийский патент № 040778

   Библиографические данные
(11)040778    (13) B1
(21)201891335

 A ]   B ]   C ]   D ]   E ]   F ]   G ]   H ] 

Текущий раздел: C     


Документ опубликован 2022.07.27
Текущий бюллетень: 2022-07  
Все публикации: 040778  
Реестр евразийского патента: 040778  

(22)2016.12.02
(51) C12N 1/38 (2006.01)
C12N 1/20 (2006.01)
C12P 1/04(2006.01)
(43)A1 2018.11.30 Бюллетень № 11  тит.лист, описание 
(45)B1 2022.07.27 Бюллетень № 07  тит.лист, описание 
(31)62/262,886; 62/262,888
(32)2015.12.03; 2015.12.03
(33)US; US
(86)US2016/064855
(87)2017/096324 2017.06.08
(71)ЛАНЦАТЕК НЗ, ИНК. (US)
(72)Вальгепея Каспар (AU), Кёпке Михаэль, Берендорфф Джеймс Брюс Ярнтон Хэйкок (US), Марселлин Эстебан, Нильсен Ларс К., Лемгрубер Ренато де С.П. (AU)
(73)ЛАНЦАТЕК НЗ, ИНК. (US)
(74)Осипов К.В., Хмара М.В., Липатова И.И., Новоселова С.В., Ильмер Е.Г., Пантелеев А.С., Дощечкина В.В. (RU)
(54)ДОБАВЛЕНИЕ АРГИНИНА С ЦЕЛЬЮ ПОВЫШЕНИЯ ЭФФЕКТИВНОСТИ АЦЕТОГЕНОВ, ФЕРМЕНТИРУЮЩИХ ГАЗ
   Формула 
(57) 1. Способ повышения эффективности ферментации газообразного С1-содержащего субстрата при получении продукта,
при этом указанный способ включает
a) впускание потока газообразного С1-содержащего субстрата в биореактор, содержащий культуру С1-фиксирующего микроорганизма в жидкой питательной среде; и
b) ферментацию культуры с целью получения по меньшей мере одного продукта,
при этом аргинин добавляют в культуру в качестве единственного источника азота, и
при этом С1-фиксирующий микроорганизм представляет собой рекомбинантный генетически модифицированный микроорганизм, содержащий путь метаболизма аргинина, и где С1-фиксирующий микроорганизм представляет собой Clostridium.
2. Способ по п.1, отличающийся тем, что указанный путь метаболизма аргинина включает в себя путь аргининдезиминазы и/или путь аргининдекарбоксилазы, при этом путь аргининдезиминазы включает в себя один или большее количество ферментов, выбранных из группы, состоящей из аргининдезиминазы (ЕС 3.5.3.6), орнитинкарбамоилтрансферазы (ЕС 2.1.3.3) и карбаматкиназы (ЕС 2.7.2.2), а путь аргининдекарбоксилазы включает в себя один или большее количество ферментов, выбранных из группы, состоящей из аргининдекарбоксилазы (ЕС 4.1.1.19), агматиндезиминазы (ЕС 3.5.3.12), путресцинкарбамоилтрансферазы (ЕС 2.1.3.6) и карбаматкиназы (ЕС 2.7.2.2).
3. Способ по п.2, где указанный путь метаболизма аргинина включает в себя одно или более из сверхэкспрессированного эндогенного фермента, мутированного эндогенного фермента или экзогенного фермента.
4. Способ по п.1, отличающийся тем, что аргинин добавляют в культуру в количестве, превышающем потребности клеток культуры вплоть до 1000 раз.
5. Способ по п.1, отличающийся тем, что концентрация аргинина в биореакторе составляет по меньшей мере 20 мг/л.
6. Способ по п.1, отличающийся тем, что потребность клеток культуры составляет 0,012 г аргинина на грамм клеточной биомассы.
7. Способ по п.1, отличающийся тем, что указанный продукт выбирают из группы, состоящей из этанола, 2,3-бутандиола, 1,3-бутандиола, лактата, сукцината, метилэтилкетона (MEK), бутирата, 2-бутанола, 1,2-пропандиола (1,2-PDO), 1-пропанола, изопропанола (IPA), ацетоина, изобутанола, изопрена, фарнезена, бисаболена, пинена, лимонена, ацетона, 3-гидроксибутирата, 2-гидроксиизомасляной кислоты (2-HIBA), цитрамалата, бутадиена, полимолочной кислоты, 1-бутанола, 3-гидроксипропионата (3-НР), бензоата, этиловых эфиров жирной кислоты, жирных кислот и изобутилена.
8. Способ по п.1, где аргинин катаболизируется посредством пути метаболизма аргинина для продуцирования аммония, при этом С1-фиксирующий микроорганизм использует аммоний в качестве источника азота.
9. Способ по п.1, отличающаяся тем, что указанный С1-фиксирующий микроорганизм содержит разрушающую мутацию в транспортере аргинина:орнитина.
10. Способ по п.1, где С1-фиксирующий микроорганизм содержит одну или большее количество генетических модификаций в пути метаболизма аргинина, причем одна или большее количество генетических модификаций выбраны из группы, состоящей из (i) разрушающей мутации регуляторных элементов и (ii) замены сайтов связывания оператора или нативных промоторов на конститутивные или синтетические промоторы.
11. Способ по п.10, отличающийся тем, что указанная разрушающая мутация представляет собой нокаут репрессора аргинина argR.
12. Способ по п.10, отличающийся тем, что указанная замена представляет собой замену промотора оперона пути аргининдезиминазы на конститутивный или синтетический промотор.