Евразийский сервер публикаций

Евразийский патент № 044224

   Библиографические данные
(11)044224    (13) B1
(21)201992610

 A ]   B ]   C ]   D ]   E ]   F ]   G ]   H ] 

Текущий раздел:      


Документ опубликован 2023.07.31
Текущий бюллетень: 2023-07  
Все публикации: 044224  
Реестр евразийского патента: 044224  

(22)2018.05.03
(51) C12N 5/0783 (2010.01)
A61K 35/17(2015.01)
(43)A1 2020.04.23 Бюллетень № 04  тит.лист, описание 
(45)B1 2023.07.31 Бюллетень № 07  тит.лист, описание 
(31)1707048.3
(32)2017.05.03
(33)GB
(86)EP2018/061413
(87)2018/202808 2018.11.08
(71)КИНГ'З КОЛЛЕДЖ ЛОНДОН; ГАММАДЕЛЬТА ТЕРАПЬЮТИКС ЛИМИТЕД (GB)
(72)Битсон Ричард, Хэйдэй Адриан, Нусбаумер Оливер, Вулф Ричард, Ианнитто Мария Луиза, Маунт Натали (GB)
(73)КИНГ'З КОЛЛЕДЖ ЛОНДОН; ГАММАДЕЛЬТА ТЕРАПЬЮТИКС ЛИМИТЕД (GB)
(74)Медведев В.Н. (RU)
(54)ЭКСПАНСИЯ γδ-T-КЛЕТОК, КОМПОЗИЦИИ И СПОСОБЫ ИХ ПРИМЕНЕНИЯ
   Формула 
(57) 1. Способ экспансии gd-Т-клеток in vitro, включающий стадии:
(i) получения популяции gd-Т-клеток, полученных из негемопоэтической ткани;
(ii) отделения gd-Т-клеток от негемопоэтических клеток для получения отделенной популяции gd-Т-клеток; и
(iii) культивирования отделенных на этапе (ii) gd-Т-клеток в присутствии:
(a) IL-2 или IL-9; (b) IL-15; и (c)IL-21
в течение по меньшей мере 5 дней в количествах, эффективных для получения подвергнутой экспансии популяции gd-Т-клеток,
где менее 1% клеток в культуре на стадии (iii) представляют собой стромальные клетки; и
где стадия (iii) включает культивирование gd-Т-клеток в отсутствие экзогенных агонистов пути TCR.
2. Способ по п.1, где стадия (iii) дополнительно включает культивирование gd-Т-клеток в присутствии IL-4.
3. Способ по п.1, где стадия (iii) дополнительно включает культивирование gd-Т-клеток в присутствии IL-2, IL-15 и фактора, выбранного из группы, состоящей из IL-21, фактора стромальных клеток (SDF), IL-1b, IL-12, IL-18 и IL-33, в течение по меньшей мере 5 дней для получения подвергнутой экспансии популяции gd-Т-клеток.
4. Способ по любому из пп.1-3, где стадия (iii) включает культивирование gd-Т-клеток в бессывороточной среде.
5. Способ по любому из пп.1-4, где:
(а) менее 1% клеток в культуре на стадии (iii) представляют собой опухолевые клетки; и/или
(b) менее 1% клеток в культуре на стадии (iii) представляют собой фидерные клетки.
6. Способ по любому из предшествующих пунктов, где стадия (iii) включает культивирование gd-Т-клеток в бессывороточной среде.
7. Способ по любому из предшествующих пунктов, где стадия (iii) включает культивирование gd-Т-клеток в отсутствие контакта gd-Т-клеток со стромальными клетками.
8. Способ по любому из предшествующих пунктов, где стадия (ii) отделения gd-Т-клеток от негемопоэтических клеток включает культивирование gd-Т-клеток и негемопоэтических клеток на синтетическом каркасе, сконфигурированном для облегчения выхода клеток из негемопоэтической ткани.
9. Способ по любому из предшествующих пунктов, где стадия (ii) отделения gd-Т-клеток от негемопоэтических клеток включает культивирование gd-Т-клеток и негемопоэтических клеток в присутствии IL-2 и/или IL-15.
10. Способ по любому из предшествующих пунктов, где отделенная популяция лимфоцитов содержит отделенную популяцию gd-Т-клеток, и отделенная популяция gd-Т-клеток содержит отделенную популяцию Vd1-Т-клеток.
11. Способ по любому из предшествующих пунктов, где (а) по меньшей мере 80% отделенной популяции gd-Т-клеток представляют собой Vd1-Т-клетки перед экспансией, и/или (b) менее 10% отделенной популяции gd-Т-клеток представляют собой Vd2-T-клетки перед экспансией.
12. Способ по любому из предшествующих пунктов, где ab-Т-клетки и/или NK-клетки удаляют из отделенной популяция gd-Т-клеток.
13. Способ по любому из предшествующих пунктов, где в течение 14 дней культивирования подвергнутая экспансии популяция gd-Т-клеток содержит по меньшей мере 20-кратное количество gd-Т-клеток относительно отделенной популяции gd-Т-клеток перед экспансией.
14. Способ по любому из предшествующих пунктов, где в течение 21 дня культивирования подвергнутая экспансии популяция gd-Т-клеток содержит по меньшей мере 50-кратное количество gd-Т-клеток относительно отделенной популяции gd-Т-клеток перед экспансией.
15. Способ по любому из предшествующих пунктов, где подвергнутая экспансии популяция gd-Т-клеток содержит подвергнутую экспансии популяцию Vd1-Т-клеток.
16. Способ по п.15, где в течение 14 дней культивирования подвергнутая экспансии популяция Vd1-Т-клеток содержит по меньшей мере 20-кратное количество Vd1-Т-клеток относительно отделенной популяции Vd1-Т-клеток перед экспансией.
17. Способ по п.15 или п.16, где в течение 21 дня культивирования подвергнутая экспансии популяция Vd1-Т-клеток содержит по меньшей мере 50-кратное количество Vd1-Т-клеток относительно отделенной популяции Vd1-Т-клеток перед экспансией.
18. Способ по любому из предшествующих пунктов, где негемопоэтическая ткань является кожей.