Евразийский сервер публикаций

Евразийский патент № 044802

   Библиографические данные
(11)044802    (13) B1
(21)202092454

 A ]   B ]   C ]   D ]   E ]   F ]   G ]   H ] 

Текущий раздел:      


Документ опубликован 2023.10.02
Текущий бюллетень: 2023-10  
Все публикации: 044802  
Реестр евразийского патента: 044802  

(22)2019.04.10
(51) G01N 33/543 (2006.01)
G01N 33/68(2006.01)
(43)A1 2021.01.15 Бюллетень № 01  тит.лист, описание 
(45)B1 2023.10.02 Бюллетень № 10  тит.лист, описание 
(31)62/655,887
(32)2018.04.11
(33)US
(86)US2019/026699
(87)2019/199910 2019.10.17
(71)РИДЖЕНЕРОН ФАРМАСЬЮТИКАЛЗ, ИНК. (US)
(72)Партридж Майкл, Оливейра Самнер Джайэн, Зилстра Джошуа (US)
(73)РИДЖЕНЕРОН ФАРМАСЬЮТИКАЛЗ, ИНК. (US)
(74)Медведев В.Н. (RU)
(54)СПОСОБЫ И КОМПОЗИЦИИ ДЛЯ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ IL-33
   Формула 
(57) 1. Способ уменьшения интерференции в анализе IL-33, включающий следующие стадии:
подкисление образца до рН, достаточного для диссоциации IL-33 из комплексов IL-33 в образце;
последующая нейтрализация подкисленного образца забуференным основным раствором, содержащим реагент для обнаружения и блокирующий агент, который ингибирует образование комплекса IL-33;
добавление в образец реагента для захвата и
обнаружение реагента для обнаружения, где количество обнаруженного реагента для обнаружения коррелирует с количеством IL-33 в образце.
2. Способ по п.1, где образец содержит кровь, сыворотку или плазму.
3. Способ по п.2, где образец взят у субъекта, которому вводили лекарственный препарат к IL-33.
4. Способ по п.3, где лекарственный препарат к IL-33 содержит антитело против IL-33.
5. Способ по любому из пп.1-4, где комплекс IL-33 содержит IL-33, нековалентно связанный с белком.
6. Способ по п.5, где белок представляет собой эндогенный сывороточный белок.
7. Способ по п.5, где белок представляет собой ST2 или его фрагмент, связывающий IL-33.
8. Способ по п.5, где белок представляет собой антитело против IL-33 или его фрагмент, связывающий IL-33.
9. Способ по любому из пп.1-8, где образец подкисляют до рН от 3 до 5.
10. Способ по любому из пп.1-9, где образец подкисляют в течение 5-60 мин.
11. Способ по любому из пп.1-10, где реагент для обнаружения содержит антитело против IL-33, конъюгированное с обнаруживаемой меткой.
12. Способ по любому из пп.1-11, где реагент для обнаружения содержит обнаруживаемый агент, выбранный из группы, состоящей из частицы редкого переходного металла, флуорофора, хромофора, квантовой точки и наночастиц благородных металлов.
13. Способ по любому из пп.1-12, где реагент для обнаружения метят рутением.
14. Способ по любому из пп.1-13, где реагент для захвата конъюгируют с твердой подложкой.
15. Способ по любому из пп.1-14, где реагент для захвата является биотинилированным.
16. Способ по любому из пп.1-15, где образец подкисляют уксусной кислотой.
17. Способ по любому из пп.1-16, где забуференный основной раствор содержит блокирующий агент и блокирующий агент представляет собой антитело.
18. Способ по любому из пп.1-17, где забуференный основной раствор содержит блокирующий агент и блокирующий агент представляет собой антитело против ST2.
19. Способ по любому из пп.1-18, где реагент для захвата добавляют к образцу на стадии подкисления.
20. Способ по любому из пп.1-19, где блокирующий агент добавляют к образцу после стадии нейтрализации.
21. Способ по любому из пп.1-20, где реагент для захвата и блокирующий агент добавляют к образцу после стадии нейтрализации.
22. Способ по любому из пп.1-21, где способ имеет чувствительность 12,5 пг/мл.
23. Способ по любому из пп.1-22, где способ имеет нечувствительность к ST2 >50 нг/мл.
24. Способ по любому из пп.1-23, где образец получают от субъекта, у которого диагностировано или подозревается воспалительное заболевание или расстройство.
25. Способ по любому из пп.1-24, где образец получают от субъекта, у которого диагностирована или подозревается астма, хроническое обструктивное заболевание легких или атопический дерматит.
26. Способ по п.14, где твердая подложка представляет собой платформу для электрохемилюминесценции.
27. Способ по любому из пп.1-26, где количество IL-33 определяют путем корреляции количества обнаруженного реагента для обнаружения с заранее определенным эталонным стандартом.
28. Способ количественного определения интерлейкина-33 в образце сыворотки, включающий следующие стадии:
подкисление образца сыворотки до рН, достаточного для диссоциации комплексов IL-33 в образце;
нейтрализация подкисленного образца забуференным основным раствором, содержащим: (a) антитело против человеческого IL-33, меченное обнаруживаемой меткой, и (b) антитело против человеческого ST2;
добавление образца к покрытой авидином твердой подложке, содержащей биотинилированное антитело против человеческого IL-33; и
обнаружение обнаруживаемой метки на покрытой авидином твердой подложке, где количество обнаруживаемой метки коррелирует с количеством IL-33 в образце.
29. Способ по п.28, где твердая подложка представляет собой покрытую стрептавидином платформу для электрохемилюминесценции.
30. Способ по любому из пп.28 или 29, где обнаруживаемая метка представляет собой рутений.
31. Способ по любому из пп.28-30, где антитело против человеческого ST2 присутствует в количестве, достаточном для снижения связывания ST2 с IL-33 в образце.
32. Способ по любому из пп.28-30, где способ имеет чувствительность 12,5 пг/мл и нечувствительность к ST2 >50 нг/мл.
Zoom in