Евразийский сервер публикаций

Евразийский патент № 045256

   Библиографические данные
(11)045256    (13) B1
(21)202092781

 A ]   B ]   C ]   D ]   E ]   F ]   G ]   H ] 

Текущий раздел: C     


Документ опубликован 2023.11.09
Текущий бюллетень: 2023-11  
Все публикации: 045256  
Реестр евразийского патента: 045256  

(22)2019.05.21
(51) C12P 33/02 (2006.01)
C12N 9/02(2006.01)
(43)A1 2021.02.12 Бюллетень № 02  тит.лист, описание  последовательности 
(45)B1 2023.11.09 Бюллетень № 11  тит.лист, описание  последовательности 
(31)00629/18
(32)2018.05.22
(33)CH
(86)EP2019/063079
(87)2019/224189 2019.11.28
(71)ДСМ АЙПИ АССЕТС Б.В. (NL)
(72)Фаррелл Кристофер Марк, Лапраде Лиза Энн (US), Леманн Отто Мартин (CH), Трухарт Джошуа (US), Шеврё Бастьен Жан Вольфганг (CH)
(73)ДСМ АЙПИ АССЕТС Б.В. (NL)
(74)Фелицына С.Б. (RU)
(54)ОПТИМИЗАЦИЯ С-5-ДЕСАТУРАЦИИ СТЕРОЛОВ
   Формула 
(57) 1. Вырабатывающая холестерин дрожжевая клетка, экспрессирующая гетерологичный фермент, обладающий активностью С5-стеролдесатуразы, который по меньшей мере на 80% идентичен SEQ ID NO: 2, 4, 6 или 8, где дрожжевая клетка способна продуцировать 7-дегидрохолестерин (7-DHC) и где соотношение 7-DHC к побочным продуктам, включая ланостерол и латостерол, повышается по меньшей мере на 5% по сравнению с дрожжевой клеткой, которая не экспрессирует гетерологичную С5-стеролдесатуразу.
2. Вырабатывающая холестерин дрожжевая клетка по п.1, вырабатывающая смесь стеролов, содержащую по меньшей мере 84% 7-DHC от общего количества стеролов.
3. Вырабатывающая холестерин дрожжевая клетка по п.1 или 2, где соотношение 7-DHC к холеста-7-енолу и/или ланостеролу составляет 18 или более по сравнению с контролем.
4. Вырабатывающая холестерин дрожжевая клетка по п.1 или 2, где соотношение 7-DHC к холеста-7-енолу и/или ланостеролу повышается по меньшей мере на 5% по сравнению с контролем.
5. Вырабатывающая холестерин дрожжевая клетка по любому из пп.1-4, где гетерологичная С5-стеролдесатураза получена из Pichia pastoris, Penicillium roqueforti, Schizosaccharomyces pombe или Saccharomyces cerevisiae.
6. Вырабатывающая холестерин дрожжевая клетка по любому из пп.1-5, дополнительно включающая инактивацию эндогенных генов, кодирующих ERG5 и ERG6.
7. Вырабатывающая холестерин дрожжевая клетка по любому из пп.1-6, дополнительно экспрессирующая гетерологичную D24-стеролредуктазу позвоночных.
8. Вырабатывающая холестерин дрожжевая клетка по любому из пп.1-7, дополнительно экспрессирующая гетерологичный фермент, обладающий активностью С8-изомеразы, которая по меньшей мере на 80% идентична полипептиду по SEQ ID NO: 14.
9. Способ снижения количества холеста-7-енола и/или ланостерола в смеси стеролов, вырабатываемых дрожжевой клеткой, включающий культивирование дрожжевой клетки по любому из пп.1-8 в подходящих условиях культивирования.
10. Способ получения смеси стеролов, содержащей по меньшей мере 84% 7-DHC, включающий культивирование дрожжевой клетки по любому из пп.1-8 в условиях, подходящих для получения стеролов, где соотношение 7-DHC к холеста-7-енолу и/или ланостеролу в смеси стеролов составляет более 17,2.
11. Способ по п.10, где 7-DHC дополнительно превращается в витамин D3.
12. Способ по п.10 или 11, где 7-DHC и/или витамин D3 дополнительно превращаются в С25-гидроксилированные производные.