Евразийский сервер публикаций

Евразийский патент № 045258

   Библиографические данные
(11)045258    (13) B1
(21)202091333

 A ]   B ]   C ]   D ]   E ]   F ]   G ]   H ] 

Текущий раздел: C     


Документ опубликован 2023.11.09
Текущий бюллетень: 2023-11  
Все публикации: 045258  
Реестр евразийского патента: 045258  

(22)2018.11.26
(51) C12N 5/0783(2010.01)
(43)A1 2020.08.25 Бюллетень № 08  тит.лист, описание  последовательности 
(45)B1 2023.11.09 Бюллетень № 11  тит.лист, описание  последовательности 
(31)62/591,041; 10 2017 127 984.9
(32)2017.11.27; 2017.11.27
(33)US; DE
(86)US2018/062442
(87)2019/104269 2019.05.31
(71)ИММАТИКС ЮС, ИНК. (US)
(72)Дао Моник, Мата Мелинда, Новика Александра, Биллиард Янник, Уолтер Стеффен (US), Миссель Сара, Куттруфф-Кокуй Сабрина, Хилф Норбет (DE)
(73)ИММАТИКС ЮС, ИНК. (US)
(74)Угрюмов В.М., Гизатуллин Ш.Ф. (RU)
(54)СПОСОБЫ АКТИВАЦИИ, МОДИФИКАЦИИ И ЭКСПАНСИИ γδ T-КЛЕТОК ДЛЯ ЛЕЧЕНИЯ РАКА И СВЯЗАННЫХ С НИМ ЗЛОКАЧЕСТВЕННЫХ ЗАБОЛЕВАНИЙ
   Формула 
(57) 1. Способ активации и экспансии gd T-клеток in vitro, включающий
выделение gd T-клеток из пробы, полученной при лейкаферезе взятого у человека образца;
активацию выделенных gd T-клеток в присутствии аминобисфосфоната, рекомбинантного интерлейкина человека 2 (ИЛ-2) и рекомбинантного интерлейкина человека 15 (ИЛ-15); и
экспансию активированных gd T-клеток без аминобисфосфоната и в присутствии рекомбинантного интерлейкина человека 2 (ИЛ-2) и рекомбинантного интерлейкина человека 15 (ИЛ-15);
причем степень экспансии экспансированных gd T-клеток является от примерно 10000-кратной до примерно 35000-кратной.
2. Способ по п.1, в котором аминобисфосфонат включает памидроновую кислоту, алендроновую кислоту, золедроновую кислоту, ризедроновую кислоту, ибандроновую кислоту, инкадроновую кислоту, ее соль и/или ее гидрат.
3. Способ по одному из пп.1, 2, в котором аминобисфосфонат является золедроновой кислотой.
4. Способ по одному из пп.1-3, в котором активация осуществляется в присутствии золедроновой кислоты и композиции цитокинов, состоящей из ИЛ-2 и ИЛ-15.
5. Способ по одному из пп.1-4, в котором активация осуществляется дополнительно в присутствии лиганда Toll-подобного рецептора 2 (TLR2).
6. Способ по п.5, в котором лиганд TLR2 выбран из группы, состоящей из амфотерицина B, L-теанина, таннина и полифенолов.
7. Способ по одному из пп.1-6, в котором активация осуществляется дополнительно в присутствии N-ацетилцистеина (NAC).
8. Способ по одному из пп.1-7, в котором активация осуществляется дополнительно в присутствии ингибитора COX-2.
9. Способ по п.8, в котором ингибитор COX-2 является ибупрофеном.
10. Способ по одному из пп.1-9, в котором активация осуществляется в присутствии золедроновой кислоты при концентрации примерно 1 мкМ до примерно 10 мкМ.
11. Способ по одному из пп.1-10, в котором активация осуществляется в присутствии ИЛ-2 при концентрации от примерно 10 Ед/мл до примерно 100 Ед/мл.
12. Способ по одному из пп.1-9, в котором активация осуществляется в присутствии золедроновой кислоты при концентрации от примерно 1 мкМ до примерно 100 мкМ, ИЛ-2 при концентрации от примерно 10 Ед/мл до примерно 200 Ед/мл и ИЛ-15 при концентрации примерно 10-500 нг/мл.
13. Способ по одному из пп.1-9 и 12, в котором экспансия производится в присутствии ИЛ-2 при концентрации от примерно 10 Ед/мл до примерно 100 Ед/мл и/или ИЛ-15 при концентрации примерно 50-200 нг/мл.
14. Популяция экспансированных gd T-клеток, полученных с помощью способа по одному из пп.1-13, в которой плотность экспансированных gd T-клеток составляет по меньшей мере примерно 1´105 клеток/мл, по меньшей мере примерно 1´106 клеток/мл, по меньшей мере примерно 1´107 клеток/мл, по меньшей мере примерно 1´108 клеток/мл или по меньшей мере примерно 1´109 клеток/мл.
15. Способ активации и экспансии gd T-клеток in vitro, включающий
выделение gd T-клеток из мононуклеарных клеток периферической крови (МКПК) субъекта человеческого происхождения;
в котором выделение включает
контактирование МКПК с антителами к a- и b-T-клеточному рецептору (ТКР);
истощение a- и b-ТКР-положительных клеток из МКПК;
активацию выделенных gd T-клеток в присутствии аминобисфосфоната, рекомбинантного интерлейкина человека 2 (ИЛ-2) и рекомбинантного интерлейкина человека 15 (ИЛ-15); и
экспансию активированных gd T-клеток без аминобисфосфоната и в присутствии рекомбинантного интерлейкина человека 2 (ИЛ-2) и рекомбинантного интерлейкина человека 15 (ИЛ-15);
причем степень экспансии экспансированных gd T-клеток является от примерно 10000-кратной до примерно 35000-кратной.
16. Способ по одному из пп.1-15, дополнительно включающий трансдукцию активированных gd T-клеток рекомбинантным вирусным вектором.
17. Способ по п.16, в котором вирусный вектор является ретровирусным вектором, лентивирусным вектором, аденоассоциированным вирусом (AAV) или транспозоном.
18. Способ по п.16 или 17, в котором вирусный вектор является лентивирусным вектором.
19. Способ по одному из пп.16-18, в котором вирусный вектор включает ген RD114TR, последовательность которого по меньшей мере на 95% идентична SEQ ID NO: 1, кодирующей оболочечный белок.
20. Способ по одному из пп.16-19, в котором вирусный вектор кодирует CD8 и/или ab-ТКР.
21. Способ по одному из пп.16-20, в котором трансдукция осуществляется в присутствии энхансера трансдукции.
22. Способ по п.21, в котором энхансер трансдукции является RetroNectinÒ или VectoFusin-1Ò.
23. Сконструированная gd T-клетка, полученная с помощью способа по одному из пп.16-22.
24. Популяция экспансированных и активированных gd T-клеток, полученных с помощью способа по одному из пп.15-22.
25. Способ по одному из пп.15-22, дополнительно включающий фосфоантиген, выбранный из группы, состоящей из (E)-4-гидрокси-3-метил-бут-2-енилпирофосфата (ГМБПФ), изопреноидпирофосфатов (фарнезилпирофосфата (ФПФ), геранилгеранилпирофосфата (ГГПФ), изопентенилпирофосфата (ИПФ) и диметилаллилдифосфата (ДМАДФ).