Евразийский сервер публикаций

Евразийский патент № 045289

   Библиографические данные
(11)045289    (13) B1
(21)202091912

 A ]   B ]   C ]   D ]   E ]   F ]   G ]   H ] 

Текущий раздел: C     


Документ опубликован 2023.11.14
Текущий бюллетень: 2023-11  
Все публикации: 045289  
Реестр евразийского патента: 045289  

(22)2019.02.08
(51) C12N 5/0783(2010.01)
(43)A1 2021.04.22 Бюллетень № 04  тит.лист, описание  последовательности 
(45)B1 2023.11.14 Бюллетень № 11  тит.лист, описание  последовательности 
(31)62/628,521; 10 2018 102 971.3; 62/633,113; 10 2018 104 628.6; 62/647,571; 10 2018 108 996.1; 62/726,350
(32)2018.02.09; 2018.02.09; 2018.02.21; 2018.02.28; 2018.03.23; 2018.04.16; 2018.09.03
(33)US; DE; US; DE; US; DE; US
(86)US2019/017237
(87)2019/157298 2019.08.15
(71)ИММАТИКС ЮС, ИНК. (US)
(72)Калра Мамта, Коуглин Зое, Алперт Амир, Вальтер Штеффен, Мохамед Али, Бургонь Агате (US)
(73)ИММАТИКС ЮС, ИНК. (US)
(74)Строкова О.В., Гизатуллин Ш.Ф., Угрюмов В.М. (RU)
(54)СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ Т-КЛЕТОК
   Формула 
(57) 1. Способ трансдукции T-клеток, включающий
размораживание замороженных мононуклеарных клеток периферической крови (МКПК),
нахождение в стадии покоя размороженных МКПК в течение от 4 до 6 часов,
активацию T-клеток в МКПК, находящихся в стадии покоя, при помощи антитела к CD3 и антитела к CD28,
трансдукцию активированных T-клеток вирусным вектором, при этом вирусный вектор является ретровирусным вектором, экспрессирующим T-клеточный рецептор (ТКР),
увеличение трансдуцированных T-клеток в присутствии интерлейкина 7 (ИЛ-7) и интерлейкина 15 (ИЛ-15), и
получение экспансированных T-клеток.
2. Способ по п.1, в котором стадия активации включает иммобилизацию T-клеток в МКПК, находящихся в стадии покоя, при помощи антитела к CD3 и антитела к CD28 на твердофазной подложке.
3. Способ по п.1, в котором кратность экспансии полученных T-клеток с продолжительностью стадии покоя от примерно 4 часов до примерно 6 часов по меньшей мере примерно в 1,5 раза выше, чем кратность экспансии полученных T-клеток, произведенных в идентичных условиях с продолжительностью стадии покоя от примерно 16 до примерно 20 часов.
4. Способ по любому из пп.1-3, в котором концентрация ИЛ-7 при экспансии составляет от примерно 1 нг/мл до 100 нг/мл, и концентрация ИЛ-15 при экспансии составляет примерно от 5 нг/мл до 500 нг/мл.
5. Способ по любому из пп.1-4, в котором стадия покоя проводится в присутствии по меньшей мере одного цитокина и, возможно, цитокин включает интерлейкин 7 (ИЛ-7) и/или интерлейкин 15 (ИЛ-15).
6. Способ по любому из пп.1-5, в котором активация проводится в течение периода времени от примерно 6 часов до примерно 72 часов.
7. Способ по любому из пп.1-6, в котором трансдукция проводится в течение периода времени от примерно 1 часа до примерно 72 часов.
8. Способ по любому из пп.1-7, в котором трансдукция проводится в присутствии по меньшей мере одного цитокина.
9. Способ по любому из пп.1-8, в котором размораживание, пребывание в стадии покоя, активация, трансдукция, экспансия и получение проводятся в закрытой системе.
10. Способ по п.9, в котором закрытой системой является CliniMACS ProdigyÔ, биореактор WAVE (XURIÔ), биореактор WAVE (XURIÔ) в сочетании с BioSafe SepaxÔ II, закрытая система G-Rex/GatheRexÔ или закрытая система G-Rex/GatheRexÔ в сочетании с BioSafe SepaxÔ II.
11. Способ по любому из пп.1-10, в котором активация проводится в течение не более чем 1 дня.
12. Способ по любому из пп.1-11, в котором количество полученных экспансированных T-клеток составляет по меньшей мере 1´109 клеток.
13. Способ по любому из пп.1-11, в котором количество экспансированных T-клеток составляет по меньшей мере 1´1013 клеток.