(57) 1. Фармацевтическая композиция, содержащая в качестве активного ингредиента рекомбинантный эритропоэтин человека (rhEPO), профиль изоэлектрической точки которого составляет от 4,25 до 5,85, где микрогетерогенность фукозилированных N-гликанов образована би-, три- и тетраантенарными структурами, которые имеют моно- и бисиалилированные остатки сиаловой кислоты в диапазоне 40-60% всех гликанов, трисиалилированные - в диапазоне 40-43% всех гликанов и тетрасиалилированные - в диапазоне 10-13% всех гликанов, и фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество.
2. Фармацевтическая композиция по п.1, отличающаяся тем, что сайт О-гликозилирования в серине 126 имеет 3 сиалоформы, которые имеют от 0 до 2 остатков сиаловой кислоты, где моносиалилированная структура является наиболее распространенной и составляет 78-82% всех гликанов, и асиалилированные структуры составляют 6-10% всех гликанов.
3. Фармацевтическая композиция по п.1, отличающаяся тем, что сайт N-гликозилирования аспарагина 83 содержит
фукозилированные биантенарные структуры с 1 и 2 остатками сиаловой кислоты, где указанные структуры составляют 8-12% всех гликанов,
фукозилированные триантенарные структуры с 1, 2 и 3 остатками сиаловой кислоты, где эти структуры составляют 17-21% всех гликанов,
фукозилированные тетраантенарные структуры с 1-4 остатками сиаловой кислоты, где указанные структуры составляют 27-31% всех гликанов, и
фукозилированные тетраантенарные структуры с N-ацетиллактозамином 1 и 2 типа, которые представляют 1-4 остатка сиаловой кислоты, где указанные структуры составляют 38-42% всех гликанов.
4. Фармацевтическая композиция по п.1, отличающаяся тем, что фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество включает биоадгезивные полимеры и стабилизаторы белков.
5. Фармацевтическая композиция по п.4, отличающаяся тем, что биоадгезивные полимеры выбраны из группы, содержащей
гидроксиметилцеллюлозу,
гидроксипропилцеллюлозу и
метилцеллюлозу.
6. Фармацевтическая композиция по п.4, отличающаяся тем, что стабилизаторы белков выбраны из группы, содержащей
L-триптофан,
L-лейцин,
гидрохлорид L-аргинина и
гидрохлорид L-гистидина.
7. Способ получения rhEPO, профиль изоэлектрической точки которого составляет от 4,25 до 5,85, где микрогетерогенность фукозилированных N-гликанов образована би-, три- и тетраантенарными структурами, которые имеют моно- и бисиалилированные остатки сиаловой кислоты в диапазоне 40-60% всех гликанов, трисиалилированные в диапазоне 40-43% всех гликанов и тетрасиалилированные в диапазоне 10-13% всех гликанов согласно п.1 без дополнительных химических и генетических модификаций, в котором процесс ферментации происходит в баке-смесителе, и в процессе очистки используют хроматографический этап с монолитной колонкой в качестве анионообменника с четвертичным аммонийным лигандом Q.
8. Способ по п.7, отличающийся тем, что процесс ферментации rhEPO проводят в баке-смесителе при температуре 35°С и в диапазоне рН 7,2-7,3, в безбелковой культуральной среде, дополненной глутамином, с получением конечной концентрации глутамина от 8 до 12 ммоль/л.
9. Способ по п.7, отличающийся тем, что в процессе очистки используют раствор 20 ммоль/л трис в 10 ммоль/л HCl с рН 8 и проводимостью 1,5 мСм/см в качестве равновесного буфера и 50 ммоль/л раствор ацетата натрия с рН 4,41 в качестве буфера для элюирования.
10. Применение фармацевтической композиции по любому из пп.1-6 для лечения деменции, инсульта, болезни Паркинсона, атаксии, черепно-мозговой травмы, глаукомы, аутизма, гипоксии новорожденных, рассеянного склероза, бокового амиотрофического склероза и неврологического повреждения, вызываемого травмой, интоксикацией или облучением.

---