Евразийский сервер публикаций

Евразийский патент № 045398

   Библиографические данные
(11)045398    (13) B1
(21)202090994

 A ]   B ]   C ]   D ]   E ]   F ]   G ]   H ] 

Текущий раздел: C     


Документ опубликован 2023.11.22
Текущий бюллетень: 2023-11  
Все публикации: 045398  
Реестр евразийского патента: 045398  

(22)2012.06.28
(51) C12N 15/11 (2006.01)
C12N 15/113 (2010.01)
A61K 31/713 (2006.01)
A61P 31/12(2006.01)
(43)A1 2020.08.31 Бюллетень № 08  тит.лист, описание  последовательности 
(45)B1 2023.11.22 Бюллетень № 11  тит.лист, описание  последовательности 
(31)11172235.1; 13/535,454
(32)2011.06.30; 2012.06.28
(33)EP; US
(62)201690497; 2012.06.28
(71)ЭРРОУХЭД ФАРМАСЬЮТИКАЛС, ИНК. (US)
(72)Чин Дэниел (US), Деккерт Йохен, Хоссбах Маркус, Йон Маттиас (DE)
(73)ЭРРОУХЭД ФАРМАСЬЮТИКАЛС, ИНК. (US)
(74)Веселицкий М.Б., Кузенкова Н.В., Каксис Р.А., Белоусов Ю.В., Куликов А.В., Кузнецова Е.В., Кузнецова Т.В., Соколов Р.А. (RU)
(54)КОМПОЗИЦИИ И СПОСОБЫ ИНГИБИРОВАНИЯ ЭКСПРЕССИИ ГЕНОВ ВИРУСА ГЕПАТИТА В
   Формула 
(57) 1. Способ получения молекулы двунитевой рибонуклеиновой кислоты, способной ингибировать экспрессию гена вируса гепатита B, включающий:
синтез кодирующей цепи, содержащей по порядку нуклеотиды 1-19 любой из SEQ ID NO: 2, 3, 5, 6, 10, 13, 15, 17, 18, 22, 23, 26-28, 30, 37 и 42;
синтез некодирующей цепи, по меньшей мере частично комплементарной указанной кодирующей цепи; и
отжиг указанной кодирующей цепи и указанной некодирующей цепи с получением молекулы двунитевой рибонуклеиновой кислоты, где двунитевая молекула рибонуклеиновой кислоты имеет длину дуплекса от 16 до 30 нуклеотидов.
2. Способ по п.1, где указанная некодирующая цепь содержит по порядку нуклеотиды 2-18 любой из SEQ ID NO: 158-160, 162, 163, 169, 173, 175, 177, 178, 182, 183, 186, 188, 189, 191, 199 и 204.
3. Способ получения молекулы двунитевой рибонуклеиновой кислоты, способной ингибировать экспрессию гена вируса гепатита B, включающий:
синтез некодирующей цепи, содержащей по порядку нуклеотиды 2-18 любой из SEQ ID NO: 158-160, 162, 163, 169, 173, 175, 177, 178, 182, 183, 186, 188, 189, 191, 199 и 204;
синтез кодирующей цепи, по меньшей мере частично комплементарной указанной некодирующей цепи; и
отжиг указанной кодирующей цепи и указанной некодирующей цепи с получением молекулы двунитевой рибонуклеиновой кислоты, где двунитевая молекула рибонуклеиновой кислоты имеет длину дуплекса от 16 до 30 нуклеотидов.
4. Способ получения молекулы двунитевой рибонуклеиновой кислоты, способной ингибировать экспрессию гена вируса гепатита B, включающий:
синтез кодирующей цепи, содержащей модифицированную последовательность по любому из SEQ ID NO: 321-484; и
синтез некодирующей цепи, по меньшей мере частично комплементарной указанной кодирующей цепи; и
отжиг указанной кодирующей цепи и указанной некодирующей цепи с получением молекулы двунитевой рибонуклеиновой кислоты, где двунитевая молекула рибонуклеиновой кислоты имеет длину дуплекса от 16 до 30 нуклеотидов.
5. Способ по п.4, где указанная некодирующая цепь содержит по порядку нуклеотиды 2-18 любой из SEQ ID NO: 157-320.
6. Способ по п.4, где указанная некодирующая цепь содержит по порядку нуклеотиды 2-18 любой из SEQ ID NO: 158-160, 162, 163, 169, 173, 175-178, 182, 183, 186-189, 191, 199, 204, 205, 235, 242, 245, 254, 258, 261, 267, 270, 271, 275, 279, 285, 288, 294, 295, 314 и 316.
7. Способ по любому из пп.1-6, где указанная некодирующая цепь содержит по меньшей мере один модифицированный нуклеотид.
8. Способ по п.7, где указанный по меньшей мере один модифицированный нуклеотид выбран из группы, состоящей из 2'-O-метил-модифицированного нуклеотида, нуклеотида, содержащего 5'-фосфотиоатную группу, терминального нуклеотида, связанного с производным холестерина, терминального нуклеотида, связанного с бисдециламидной группой додекановой кислоты, 2'-дезокси-2'-фтор-модифицированного нуклеотида, 2'-дезокси-модифицированного нуклеотида, замкнутого нуклеотида, нуклеотида, лишенного азотистого основания, дезокситимидина, инвертированного дезокситимидина, 2'-амино-модифицированного нуклеотида, 2'-алкил-модифицированного нуклеотида, нуклеотида морфолино, фосфорамидата и нуклеотида, включающего основание, не встречающееся в природе.
9. Способ по п.7, где указанная некодирующая цепь содержит 2'-O-метил-модифицированный нуклеотид, нуклеотид, содержащий 5'-фосфотиоатную группу, и дезокситимидин.
10. Способ по п.9, где указанная некодирующая цепь содержит липкий конец из 1-2 дезокситимидинов.
11. Способ по п.4, где указанная некодирующая цепь содержит модифицированную последовательность любую из SEQ ID NO: 485-648.
12. Способ получения молекулы двунитевой рибонуклеиновой кислоты, способной ингибировать экспрессию гена вируса гепатита B, включающий:
синтез некодирующей цепи, содержащей модифицированную последовательность любую из SEQ ID NO: 485-648;
синтез кодирующей цепи, по меньшей мере частично комплементарной указанной некодирующей цепи; и
отжиг указанной кодирующей цепи и указанной некодирующей цепи с получением молекулы двунитевой рибонуклеиновой кислоты, где двунитевая молекула рибонуклеиновой кислоты имеет длину дуплекса от 16 до 30 нуклеотидов.
13. Способ по п.12, где указанная кодирующая цепь содержит по меньшей мере один модифицированный нуклеотид.
14. Способ по п.13, где указанный по меньшей мере один модифицированный нуклеотид выбран из группы, состоящей из 2'-O-метил-модифицированного нуклеотида, нуклеотида, содержащего 5'-фосфотиоатную группу, терминального нуклеотида, связанного с производным холестерина, терминального нуклеотида, связанного с бисдециламидной группой додекановой кислоты, 2'-дезокси-2'-фтор-модифицированного нуклеотида, 2'-дезокси-модифицированного нуклеотида, замкнутого нуклеотида, нуклеотида, лишенного азотистого основания, дезокситимидина, инвертированного дезокситимидина, 2'-амино-модифицированного нуклеотида, 2'-алкил-модифицированного нуклеотида, нуклеотида морфолино, фосфорамидата и нуклеотида, включающего основание, не встречающееся в природе.
15. Способ по п.13, где указанная кодирующая цепь содержит 2'-O-метил-модифицированный нуклеотид, нуклеотид, содержащий 5'-фосфотиоатную группу, и дезокситимидин.
16. Способ по п.15, где указанная кодирующая цепь содержит липкий конец из 1-2 дезокситимидинов.
17. Способ по любому из пп.1-16, где указанная кодирующая цепь содержит по порядку нуклеотиды 1-19 любой из SEQ ID NO: 2, 3 или 6.
18. Способ по любому из пп.1-17, где указанная некодирующая цепь содержит по порядку нуклеотиды 2-18 любой из SEQ ID NO: 158, 159, 160 или 163.
19. Способ по любому из пп.1-18, где указанная молекула двунитевой рибонуклеиновой кислоты содержит пары последовательностей, выбранные из группы, состоящей из SEQ ID NO: 2/158, 3/159, 3/160 и 6/163.
20. Способ по п.19, где указанная кодирующая цепь содержит последовательность SEQ ID NO: 2, и указанная некодирующая цепь содержит последовательность SEQ ID NO: 158.
21. Способ по п.19, где указанная кодирующая цепь содержит последовательность SEQ ID NO: 3, и указанная некодирующая цепь содержит последовательность SEQ ID NO: 159.
22. Способ по п.19, где указанная кодирующая цепь содержит последовательность SEQ ID NO: 3, и указанная некодирующая цепь содержит последовательность SEQ ID NO: 160.
23. Способ по п.19, где указанная кодирующая цепь содержит последовательность SEQ ID NO: 6, и указанная некодирующая цепь содержит последовательность SEQ ID NO: 163.
24. Способ по любому из пп.1-19, где указанная молекула двунитевой рибонуклеиновой кислоты содержит пары последовательностей, выбранные из группы, состоящей из SEQ ID NO: 322/486, 323/487, 324/488 и 327/491.
25. Способ по п.24, где указанная кодирующая цепь содержит последовательность SEQ ID NO: 322, и указанная некодирующая цепь содержит последовательность SEQ ID NO: 486.
26. Способ по п.24, где указанная кодирующая цепь содержит последовательность SEQ ID NO: 323, и указанная некодирующая цепь содержит последовательность SEQ ID NO: 487.
27. Способ по п.24, где указанная кодирующая цепь содержит последовательность SEQ ID NO: 324, и указанная некодирующая цепь содержит последовательность SEQ ID NO: 488.
28. Способ по п.24, где указанная кодирующая цепь содержит последовательность SEQ ID NO: 327, и указанная некодирующая цепь содержит последовательность SEQ ID NO: 491.
29. Способ по любому из пп.1-28, где указанную кодирующую цепь или указанную некодирующую цепь синтезируют с использованием твердофазного олигонуклеотидного синтеза.
30. Способ по любому из пп.1-29, дополнительно включающий очистку указанной кодирующей цепи или указанной некодирующей цепи перед отжигом с использованием колонки ВЭЖХ.
31. Способ по п.30, где указанная колонка ВЭЖХ представляет собой анионообменную колонку.
32. Способ по п.30 или 31, дополнительно включающий обессоливание указанных очищенной кодирующей цепи или очищенной некодирующей цепи.
33. Способ по любому из пп.1-32, где отжиг указанных кодирующей цепи и некодирующей цепи включает лиофилизацию смеси, содержащей указанную кодирующую цепь и указанную некодирующую цепь.
34. Способ по любому из пп.1-33, где указанная молекула двунитевой рибонуклеиновой кислоты конъюгирована с лигандом.
35. Способ по п.34, где указанный лиганд выбран из группы, состоящей из галактозы, фолиевой кислоты, холестерина, полиэтиленгликолей, кластеров углеводов, перекрестносшивающих агентов, конъюгатов порфирина и пептидов для доставки.
36. Способ по п.34, где указанный лиганд содержит галактозу.
37. Способ по п.34, где указанный лиганд содержит кластер углеводов.