(57) 1. Способ количественного определения интактного интер-альфа ингибиторного белка (IAIP) в образце, полученном от субъекта, включающий:
a) приведение в контакт образца со связывающим агентом для получения комплекса IAIP-связывающий агент, причем связывающий агент связан с подложкой, и где связывающий агент включает антитело, которое специфически связывается с бикунином;
b) приведение в контакт комплекса IAIP-связывающий агент с детектирующим агентом, где детектирующий агент включает лиганд IAIP, который связывается с по меньшей мере одной тяжелой цепью IAIP, и где лиганд IAIP выбирают из группы, стоящей из эндотоксина (ЛПС), гепарина, гистона, гиалуроновой кислоты, витронектина, фибронектина, ламинина, тенасцина С, аггрекана, фактора фон Виллебранда, пентраксина-3 (РТХ3), ФНО-стимулированного гена-6 (TSG-6), фактора IX, компонента комплемента, фактора XIIIa и тканевой трансглутаминазы;
c) определение количества детектирующего агента, связанного с комплексом IAIP-связывающий агент; и
d) сравнивания результатов, полученных на стадии с), с известной эталонной концентрацией,
где образец представляет собой кровь, плазму, сыворотку, мочу, спинномозговую жидкость, синовиальную жидкость, амниотическую жидкость, интерстициальную жидкость, фолликулярную жидкость, перитонеальную жидкость, жидкость бронхоальвеолярного лаважа, грудное молоко, мокроту, лимфу, желчь или гомогенат ткани; и
где интактный IAIP включает бикунин и по меньшей мере одну тяжелую цепь IAIP, выбранную из группы, состоящей из H1, H2 и Н3;
таким образом осуществляя количественное определение интактного IAIP в образце.
2. Способ по п.1, где по меньшей мере одно из а), b) или с) осуществляют при рН примерно от 7,0 до примерно 3,5.
3. Способ по п.2, где рН составляет примерно от 5,0 до примерно 3,5.
4. Способ по п.3, где рН составляет примерно 4,0.
5. Способ по п.1, дополнительно включающий до а) добавляют двухвалентные катионы, в образец, и где двухвалентные катионы представляют собой Са²⁺, Mg²⁺, Mn²⁺ или Fe²⁺.
6. Способ по п.1, где субъект представляет собой субъект, являющийся человеком.
7. Способ согласно любому из предыдущих пунктов, где лиганд IAIP представляет собой гепарин, гиалуроновую кислоту или гистон.
8. Способ согласно любому из предыдущих пунктов, где лиганд IAIP представляет собой гепарин.
9. Способ согласно любому из предыдущих пунктов, где детектирующий агент дополнительно включает метку, и где метка представляет собой биотин, наночастицу золота, магнитную частицу, латексную частицу, фермент, субстрат ферментов, флуоресцентный краситель, люминесцентное соединение или радиоактивную метку.
10. Способ по п.9, где метка представляет собой фермент, и где фермент представляет собой пероксидазу хрена.
11. Способ по п.9, где метка включает наночастицу золота.
12. Способ по любому из пп.9-11, где детектирующий агент включает биотин и одно из стрептавидина или авидина.
13. Способ по п.9, где фермент представляет собой пероксидазу хрена (ПХ), щелочную фосфатазу (ЩФ), b-галактозидазу, ацетилхолинэстеразу и каталазу.
14. Способ по п.9, где субстрат ферментов представляет собой п-нитрофенилфосфат (PNPP), 2,2'-азино-бис-(3-этилбензтиазолин-6- сульфониевая кислота) двуаммониевая соль (ABTS), о-фенилендиамин дигидрохлорид (OPD), 3,3',5,5'-тетраметилбензидин (ТМВ) или 3,3'-диаминобензидин (DAB).
15. Способ согласно любому из предыдущих пунктов, где образец представляет собой кровь, спинномозговую жидкость, жидкость бронхоальвеолярного лаважа, синовиальную жидкость или мокроту.
16. Способ согласно любому из предыдущих пунктов, где образец представляет собой кровь.
17. Способ согласно любому из предыдущих пунктов, где образец представляет собой плазму или сыворотку.
18. Способ по п.9, где метка представляет собой наночастицу золота, и лиганд IAIP представляет собой гепарин.
19. Способ согласно любому из предыдущих пунктов, где подложка представляет собой планшет, частицу, наночастицу, смолу, мембрану, биочип, контейнер, тест-полоску или гранулу.
20. Способ по п.19, где подложка представляет собой тест-полоску.
21. Способ по п.20, где детектирующий агент добавляют к тест-полоске до, после или одновременно с образцом.
22. Набор для количественного определения интактного IAIP в образце, причем набор содержит:
подложку,
связывающий агент, содержащий антитело, которое специфически связывается с бикунином,
где связывающий агент связан с подложкой,
детектирующий агент, содержащий метку и линанд IAIP, который связывается с по меньшей мере одной тяжелой цепью IAIP, выбранной из группы, состоящей из H1, H2 и Н3, где лиганд IAIP выбирают из группы, стоящей из эндотоксина (ЛПС), гепарина, гистона, гиалуроновой кислоты, витронектина, фибронектина, ламинина, тенасцина С, аггрекана, фактора фон Виллебранда, пентраксина-3 (РТХ3), ФНО-стимулированного гена-6 (TSG-6), фактора IX, компонента комплемента, фактора XIIIa и тканевой трансглутаминазы; и
инструкции для количественного определения IAIP в образце,
где образец представляет собой кровь, плазму, сыворотку, мочу, спинномозговую жидкость, синовиальную жидкость, амниотическую жидкость, интерстициальную жидкость, фолликулярную жидкость, перитонеальную жидкость, жидкость бронхоальвеолярного лаважа, грудное молоко, мокроту, лимфу, желчь или гомогенат ткани;
где инфарктный IAIP включает бикунин и по меньшей мере одну тяжелую цепь IAIP, выбранную из группы, состоящей из H1, H2 и Н3.
23. Набор по п.22, где набор дополнительно содержит одно или более из следующего: промывочный буфер, блокирующий агент и субстрат для обнаружения метки.
24. Набор по п.22 или 23, где лиганд IAIP представляет собой гепарин, гиалуроновую кислоту или гистон.
25. Набор по п.24, где лиганд IAIP представляет собой гепарин.
26. Набор по любому из пп.22-25, где метка представляет собой биотин, наночастицу золота, магнитную частицу, латексную частицу, фермент, субстрат ферментов, флуоресцентный краситель, люминесцентное соединение или радиоактивную метку.
27. Набор по п.26, где метка представляет собой фермент, и где фермент представляет собой пероксидазу хрена.
28. Набор по п.26, где метка включает наночастицу золота.
29. Набор по любому из пп.26-28, где детектирующий агент включает биотин и одно из стрептавидина или авидина.
30. Набор по п.26, где фермент представляет собой пероксидазу хрена (ПХ), щелочную фосфатазу (ЩФ), b-галактозидазу, ацетилхолинэстеразу и каталазу.
31. Набор по п.26, где субстрат ферментов представляет собой PNPP, ABTS, OPD, ТМВ или DAB.
32. Набор по любому из пп.22-31, где образец представляет собой кровь, спинномозговую жидкость, жидкость бронхоальвеолярного лаважа, синовиальную жидкость или мокроту.
33. Набор по любому из пп.22-32, где образец представляет собой кровь.
34. Набор по любому из пп.22-31, где кровь представляет собой плазму или сыворотку.
35. Набор по п.26, где метка представляет собой наночастицу золота, и лиганд IAIP представляет собой гепарин.
36. Набор по любому из пп.22-35, где подложка представляет собой планшет, частицу, наночастицу, смолу, мембрану, биочип, контейнер, тест-полоску или гранулу.
37. Набор по п.36, где подложка представляет собой тест-полоску.

---