Евразийский сервер публикаций

Евразийский патент № 045443

   Библиографические данные
(11)045443    (13) B1
(21)201992536

 A ]   B ]   C ]   D ]   E ]   F ]   G ]   H ] 

Текущий раздел: C     


Документ опубликован 2023.11.27
Текущий бюллетень: 2023-11  
Все публикации: 045443  
Реестр евразийского патента: 045443  

(22)2018.04.24
(51) C07K 14/725 (2006.01)
C07K 14/47(2006.01)
(43)A1 2020.03.05 Бюллетень № 03  тит.лист, описание  последовательности 
(45)B1 2023.11.27 Бюллетень № 11  тит.лист, описание  последовательности 
(31)62/489,226
(32)2017.04.24
(33)US
(86)EP2018/060477
(87)2018/197492 2018.11.01
(71)ОСПЕДАЛЕ САН РАФФАЭЛЕ С.Р.Л.; ФОНДАЦИОНЕ ЧЕНТРО САН РАФФАЭЛЕ (IT)
(72)Бонини Мариа Кьяра, Руджеро Элиана, Маньяни Зулма Ирене, Ваго Лука Адьдо Эдоардо, Бонданца Аттилио, Чичери Фабио (IT)
(73)ОСПЕДАЛЕ САН РАФФАЭЛЕ С.Р.Л.; ФОНДАЦИОНЕ ЧЕНТРО САН РАФФАЭЛЕ (IT)
(74)Медведев В.Н. (RU)
(54)TCR И ПЕПТИДЫ
   Формула 
(57) 1. Т-клеточный рецептор (TCR), который связывается с пептидом белка опухоли Вильмса 1 (WT1), когда он презентирован главным комплексом гистосовместимости (МНС), где TCR содержит следующие CDR-последовательности:
CDR1a - KALYS (SEQ ID NO: 1),
CDR2a - LLKGGEQ (SEQ ID NO: 2),
CDR3a - CGTAWINDYKLSF (SEQ ID NO: 3),
CDR1b - SGHDY (SEQ ID NO: 6),
CDR2b - FNNNVP (SEQ ID NO: 7), и
CDR3b - CASRKTGGYSNQPQHF (SEQ ID NO: 8).
2. TCR по п.1, содержащий вариабельный домен a-цепи, включающий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 4 или ее вариант, обладающий по меньшей мере 75% идентичностью последовательности с ней; и вариабельный домен b-цепи, включающий аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 9 или ее вариант, обладающий по меньшей мере 75% идентичностью последовательности с ней.
3. TCR по п.1 или 2, содержащий a-цепь, включающую аминокислотную последовательность SEQ ID NO: 5 или ее вариант, обладающий по меньшей мере 75% идентичностью последовательности с ней; и b-цепь, включающую аминокислотную последовательность, выбранную из группы, состоящей из SEQ ID NO: 10, SEQ ID NO: 11 и вариантов SEQ ID NO: 10 и 11, обладающих по меньшей мере 75% идентичностью последовательности с ними.
4. TCR по любому из предыдущих пунктов, который связывается с пептидным комплексом МНС I.
5. TCR по любому из предыдущих пунктов, который рестриктирован аллелем лейкоцитарного антигена человека (HLA).
6. TCR по любому из предыдущих пунктов, где TCR рестриктирован аллелем HLA-А*0201.
7. TCR по любому из предыдущих пунктов, включающий одну или более мутаций в области соединения a-цепи/b-цепи, в результате чего при экспрессии такой a-цепи и b-цепи в Т-клетке частота ошибочного спаривания между указанными цепями и a и b-цепями эндогенного TCR снижается.
8. TCR по п.7, где одна или более мутаций вводят один или более остатков цистеина в домен константной области каждой из a-цепи и b-цепи, где один или более остатков цистеина способны образовывать дисульфидную связь между a-цепью и b-цепью.
9. TCR по любому из предыдущих пунктов, который включает муринизированную константную область.
10. TCR по любому из предыдущих пунктов, где TCR является растворимым TCR.
11. Выделенный полинуклеотид, кодирующий a-цепь Т-клеточного рецептора (TCR) по любому из предыдущих пунктов и b-цепь TCR по любому из предыдущих пунктов.
12. Выделенный полинуклеотид по п.11, где полинуклеотид кодирует a-цепь, связанную с b-цепью.
13. Выделенный полинуклеотид по п.11 или 12, который дополнительно кодирует одну или более коротких интерферирующих РНК (миРНК) или другие средства, способные снижать или предотвращать экспрессию одного или более эндогенных генов TCR.
14. Вектор, включающий полинуклеотид по любому из пп.11-13.
15. Вектор по п.14, включающий полинуклеотид, который кодирует одну или более цепей CD3, CD8, суицидальный ген и/или селективный маркер.
16. Клетка, включающая TCR по любому из пп.1-9, полинуклеотид по любому из пп.11-13 или вектор по п.14 или 15.
17. Клетка по п.16, где клетка является Т-клеткой, лимфоцитом или стволовой клеткой.
18. Клетка по п.17, где клетка является Т-клеткой, которая была выделена у субъекта.
19. Клетка по любому из пп.16-18, где эндогенный ген в клетке, кодирующий a-цепь TCR, и/или эндогенный ген в клетке, кодирующий b-цепь TCR, прерван.
20. Способ получения клетки, который включает этап введения вектора по п.14 и/или 15 в клетку in vitro, ex vivo или in vivo, например, с помощью трансфекции или трансдукции.
21. Способ получения клетки по п.20, где клетка является Т-клеткой и где способ дополнительно включает этап редактирования Т-клетки, который включает прерывание эндогенного гена в Т-клетке, кодирующего a-цепь TCR, и/или эндогенного гена в Т-клетке, кодирующего b-цепь TCR, искусственной нуклеазой.
22. Способ получения клетки по п.21, который дополнительно включает этап направленной интеграции кассеты экспрессии в эндогенный ген, кодирующий a-цепь TCR, и/или эндогенный ген, кодирующий b-цепь TCR, прерванный искусственной нуклеазой, где кассета экспрессии включает полинуклеотидную последовательность, кодирующую TCR по любому из пп.1-11.
23. Способ получения клетки по любому из пп.20-22, который дополнительно включает этап прерывания одного или более эндогенных генов в клетке, кодирующих MHC.
24. Способ получения клетки по любому из пп.20-23, который дополнительно включает этап прерывания одного или более эндогенных генов в клетке с целью изменения персистирования, размножения, активности, устойчивости к сигналам истощения/старения/ингибирования, хоуминг-способности или других Т-клеточных функций.
25. Применение клетки по любому из пп.16-19 или клетки, полученной способом по любому из пп.20-24, для адоптивного переноса клеток.
26. Химерная молекула, включающая TCR по любому из пп.1-9, конъюгированная с неклеточным субстратом, токсином и/или антителом, где неклеточный субстрат выбран из группы, состоящей из наночастиц и экзосом.
27. Применение TCR по любому из пп.1-9, выделенного полинуклеотида по любому из пп.11-13, вектора по п.14 или 15, клетки по любому из пп.16-19, клетки, полученной способом по любому из пп.20-24, или химерной молекулы по п.26 для лечения или предотвращения заболевания, связанного с экспрессией WT1.
28. Способ лечения или предотвращения заболевания, связанного с экспрессией WT1, который включает этап введения TCR по любому из пп.1-9, выделенного полинуклеотида по любому из пп.11-13, вектора по п.14 или 15, клетки по любому из пп.16-19, клетки, полученной способом по любому из пп.20-24, или химерной молекулы по п.26 нуждающемуся в этом субъекту.
29. Применение по п.27, где заболевание, связанное с экспрессией WT1, является пролиферативным нарушением.
30. Применение по п.29, где пролиферативное нарушение является гемобластной или солидной опухолью.
31. Применение по п.30, где гемобластная опухоль является острым миелоидным лейкозом.
32. Применение по п.30, где пролиферативное нарушение является солидной опухолью.
33. Способ по п.28, где заболевание, связанное с экспрессией WT1, является пролиферативным нарушением.
34. Способ по п.33, где пролиферативное нарушение является гемобластной или солидной опухолью.
35. Способ по п.34, где гемобластная опухоль является острым миелоидным лейкозом.
36. Способ по п.34, где пролиферативное нарушение является солидной опухолью.