(57) 1. Моноклональное антитело, которое связывает c-Met человека, где антитело содержит область VH, включающую CDR1, 2 и 3 с последовательностями SEQ ID NO: 194, 195 и 196, и область VL, включающую CDR1, 2 и 3 с последовательностями SEQ ID NO: 209, 210 и 104.
2. Антитело по п.1, содержащее:
а) область VH, включающую CDR1, 2 и 3 с последовательностями SEQ ID NO: 98, 99 и 100, и область VL, включающую CDR1, 2 и 3 с последовательностями SEQ ID NO: 102, 103 и 104, или
б) область VH, включающую CDR1, 2 и 3 с последовательностями SEQ ID NO: 130, 131 и 132, и область VL, содержащую CDR1, 2 и 3 с последовательностями SEQ ID NO: 134, 135 и 136.
3. Антитело по п.1 или 2, содержащее:
a) область VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 97, и предпочтительно область VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 101,
b) область VH, содержащую последовательность SEQ ID NO: 129, и предпочтительно область VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 133, или
c) вариант любого из указанных антител, где указанный вариант предпочтительно имеет не более 1, 2 или 3 консервативных аминокислотных модификаций.
4. Моноклональное антитело, которое связывает c-Met человека, где антитело содержит область VH, содержащую CDR1, 2 и 3 с последовательностями SEQ ID NO: 189, 190 и 60, и область VL, содержащую CDR1, 2 и 3 с последовательностями SEQ ID NO: 62, 63 и 207.
5. Антитело по п.4, содержащее область VH, содержащую CDR1, 2 и 3 с последовательностью SEQ ID NO: 58, 59 и 60, и область VL, содержащую CDR1, 2 и 3 с последовательностями SEQ ID №: 62, 63 и 64.
6. Антитело по п.4 или 5, содержащее:
a) область VH, включающую последовательность SEQ ID NO: 57, и предпочтительно область VL, содержащую последовательность SEQ ID NO: 61, или
b) вариант любого из указанных антител, где указанный вариант предпочтительно имеет не более 1, 2 или 3 консервативных аминокислотных модификаций.
7. Антитело по любому из пп.1-6, которое связывает домен SEMA c-Met, предпочтительно антитело способно ингибировать связывание HGF с доменом SEMA с IC50 менее 10 мкг/мл, например менее 2 мкг/мл.
8. Антитело по любому из предыдущих пунктов, которое связывается с клетками А431 с ЕС50 10 нМ или менее, например ЕС50 2 нМ или менее.
9. Антитело по п.1, где антитело представляет собой бивалентное антитело.
10. Антитело по любому из предыдущих пунктов, которое связывается с с-Met с константой аффинности (KD) 20 нМ или менее, такой как аффинность 5 нМ или менее.
11. Антитело по любому из предыдущих пунктов, которое связывается с с-Met макаки-резус, предпочтительно для которого сигнал связывания антитела с c-Met макаки-резус по меньшей мере в 5 раз превышает сигнал для антитела отрицательного контроля.
12. Антитело по любому из предыдущих пунктов, где антитело ингибирует связывание HGF с внеклеточным доменом c-Met, предпочтительно где антитело ингибирует связывание более чем на 40%, например более чем на 50%, например более чем на 60%, например более чем на 70%, например более чем на 80%, например более чем на 90%.
13. Антитело по любому из предыдущих пунктов, которое способно ингибировать жизнеспособность клеток КР4, предпочтительно где антитело способно ингибировать жизнеспособность более чем на 10%, например более чем на 25%, например более чем на 40%.
14. Антитело по любому из предыдущих пунктов, где антитело представляет собой полноразмерное антитело, предпочтительно антитело IgG1, в частности антитело IgG1,k.
15. Антитело по любому из предыдущих пунктов, которое представляет собой антитело с дефицитной эффекторной функцией, например, стабилизированное антитело IgG4 человека, такое как антитело, в котором аргинин в положении 409 в константной области тяжелой цепи IgG4 человека заменен на лизин, треонин, метионин или лейцин, предпочтительно на лизин, и/или где шарнирная область содержит последовательность Cys-Pro-Pro-Cys.
16. Антитело по любому из предыдущих пунктов, которое представляет собой моновалентное антитело.
17. Антитело по п.16, где моновалентное антитело содержит:
(i) вариабельную область антитела по любому из пп.1-6 и
(ii) область C_H иммуноглобулина или ее фрагмент, включающий участки C_H2 и C_H3, где область C_H или ее фрагмент модифицированы так, что область, соответствующая шарнирной области, и, если иммуноглобулин не относится к изотипу IgG4, то и другие области C_H, такие как область C_H3, не содержат аминокислотных остатков, которые способны образовывать дисульфидные связи с идентичной областью C_H или другие ковалентные или стабильные нековалентные связи между тяжелыми цепями с идентичной областью C_H в присутствии поликлонального IgG человека.
18. Антитело по п.17, где иммуноглобулин, указанный на стадии (ii), относится к подтипу IgG4.
19. Антитело по п.17 или 18, в котором тяжелая цепь была модифицирована таким образом, что весь шарнир был удален.
20. Антитело по любому из пп.1-17, где антитело было модифицировано так, чтобы сделать его менее гибким, например путем мутаций шарнирной области.
21. Антитело по п.20, где антитело относится к подтипу IgG1, a шарнирная область модифицирована путем:
(i) удаления шарнирной области последовательности EPKSCDKTHTCPPCP и замены ее шарнирной областью IgG2 последовательности: ERKCCVECPPCP (IgG1-шарнир-IgG2);
(ii) удаления положения 220, чтобы модифицированная шарнирная область имела последовательность EPKSDKTHTCPPCP (IgG1 DC220);
(iii) замены цистеина в положении 220 любой другой природной аминокислотой (X), чтобы модифицированная шарнирная область имела последовательность EPKSXDKTHTCPPCP (IgG1 C220X);
(iv) удаления шарнирной области последовательности EPKSCDKTHTCPPCP (UniBody IgG1);
(v) удаления шарнирной области с последовательностью EPKSCDKTHTCPPCP и замены ее шарнирной областью IgG3 с последовательностью ELKTPLGDTTHTCPRCPEPKSCDTPPPCPRCPEPKSCDTP­PPCPRCPEPKSCDTPPPCPRCP (IgG1-шарнир-IgG3) или
(vi) замены треонина в положении 223 на цистеин и удаление лизина в положении 222 и треонина в положении 225, так что модифицированная шарнирная область имеет последовательность EPKSCDCHCPPCP (IgG1 ТН7D6-9).
22. Антитело по п.21, где шарнирная область модифицирована путем замены цистеина в положении 220 на серин, так что модифицированная шарнирная область имеет последовательность EPKSSDKTHTCPPCP (IgG1 C220S).
23. Антитело по п.20, где антитело относится к подтипу IgG2.
24. Антитело по любому из предыдущих пунктов, где антитело было модифицировано для уменьшения корового фукозилирования до менее 10%, например менее 5%, определенного с помощью высокоэффективной анионообменной хроматографии в сочетании с импульсным амперометрическим детектированием (НРАЕС-PAD).
25. Биспецифическое антитело, содержащее сайт связывания c-Met, как определено в предыдущих пунктах, и второй антигенсвязывающий сайт, имеющий иную специфичность связывания.
26. Биспецифическое антитело по п.25, содержащее область VH, содержащую CDR1, 2 и 3 с последовательностями SEQ ID NO: 98, 99 и 100, и область VL, содержащую CDR1, 2 и 3 с последовательностями SEQ ID NO: 102, 103 и 104, и второй антигенсвязывающий сайт, имеющий иную специфичность связывания.
27. Биспецифическое антитело по п.25 или 26, содержащее первый антигенсвязывающий сайт из антитела против c-Met, и второй антигенсвязывающий сайт, специфичный к рецептору эпидермального фактора роста, где первый сайт связывания антигена содержит область VH, содержащую CDR1, 2 и 3 с последовательностями SEQ ID NO: 98, 99 и 100, и область VL, содержащую CDR1, 2 и 3 с последовательностями SEQ ID NO: 102, 103 и 104.
28. Биспецифическое антитело по п.25 или 26, где второй антигенсвязывающий сайт обладает специфичностью связывания с эффекторной клеткой человека, рецептором Fc человека, В-клеточным рецептором или неперекрывающимся эпитопом c-Met.
29. Нуклеотидная последовательность, кодирующая VH и VL области антитела по любому из предыдущих пунктов.
30. Экспрессирующий вектор, включающий нуклеотидную последовательность по п.29, где вектор дополнительно содержит нуклеотидную последовательность, кодирующую функционально связанную константную область легкой цепи и константную область тяжелой цепи антитела.
31. Рекомбинантная эукариотическая или прокариотическая клетка-хозяин, содержащая экспрессирующий вектор по п.30 и которая продуцирует антитело по любому из пп.1-28.
32. Фармацевтическая композиция, содержащая антитело по любому из пп.1-28 и фармацевтически приемлемый носитель, где фармацевтическую композицию применяют для лечения расстройства, связанного с клетками, экспрессирующими c-Met.
33. Применение антитела по любому из пп.1-28 в качестве лекарственного средства для лечения расстройства, связанного с клетками, экспрессирующими c-Met.
34. Применение по п.33, где заболевание представляет собой рак.
35. Применение антитела по любому из пп.1-28 для лечения рака, где рак выбран из группы, состоящей из рака мочевого пузыря, рака молочной железы, рака шейки матки, холангиокарциномы, колоректального рака, рака эндометрия, рака пищевода, рака желудка, рака головы и шеи, рака почки, рака печени, рака легкого, рака носоглотки, рака яичников, рака поджелудочной железы, рака желчного пузыря, рака предстательной железы, рака щитовидной железы, остеосаркомы, рабдомиосаркомы, синовиальной саркомы, саркомы Капоши, лейомиосаркомы, злокачественной фиброзной гистиоцитомы, фибросаркомы, острого миелогенного лейкоза, Т-клеточного лейкоза взрослых, хронического миелоидного лейкоза, лимфомы, множественной миеломы, глиобластомы, астроцитомы, меланомы, мезотелиомы, опухоли Вильмса и опухоли MiT, включая светлоклеточную саркому (CCS), альвеолярную саркому мягких тканей (ASPS) и ассоциированную с транслокацией почечно-клеточную карциному.
36. Применение по п.35, где антитело предназначено для лечения рака в комбинации с одним или несколькими дополнительными терапевтическими агентами, такими как химиотерапевтические агенты.
37. Способ ингибирования роста и/или пролиферации опухолевых клеток, экспрессирующих c-Met, включающий введение нуждающемуся в этом индивидууму антитела по любому из пп.1-28.
38. Способ получения антитела по любому из пп.1-28, включающий стадии:
а) культивирование клетки-хозяина по п.31 и
б) очистка антитела от культуральной среды.
39. Способ обнаружения наличия c-Met в образце, включающий
приведение образца в контакт с антителом по любому из пп.1-28 в условиях, обеспечивающих образование комплекса между антителом и c-Met; и
анализ того, образовался ли комплекс.
40. Набор для обнаружения наличия c-Met в образце, характеризующийся тем, что он содержит антитело по любому из пп.1-28.
41. Антиидиотипическое антитело против антитела по любому из пп.1-24.

---