(57) 1. Неподвижная фаза для выделения внеклеточных везикул (ВВ), секретируемых эукариотическими или прокариотическими клетками в биологической жидкости, где указанная неподвижная фаза функционализирована катионами, выбранными из группы, состоящей из никеля и алюминия, имеет дзета-потенциал от 30 до 80 мВ, состоит из магнитных или немагнитных частиц микрометрического или нанометрического размера и выбрана из группы, состоящей из гранул, изготовленных из агарозы, кремния, альгинатных солевых матриц, полимеров для металл-аффинной хроматографии с иммобилизованными ионами металлов (IMAC), никелевого хелатного акцептора, анионных или углеродных стирольных полимеров.
2. Неподвижная фаза по п.1, являющаяся агарозными гранулами с частицами, имеющими средний размер 25-40 мкм, если размер является микрометровым.
3. Способ получения функционализированной неподвижной фазы по любому из пп.1, 2, включающий суспендирование нефункционализированной неподвижной фазы в солевом буферном растворе с физиологическим значением рН, содержащем 15-100 мМ соли никеля или алюминия.
4. Способ по п.3, где солевой буферный раствор с физиологическим значением рН представляет собой фосфатно-солевой буферный раствор (ФБР) или любой другой буфер с физиологическим рН.
5. Способ по любому из пп.3, 4, где суспензию инкубируют при комнатной температуре при круговом вращении при 300-600 об/мин.
6. Применение неподвижной фазы по любому из пп.1, 2 для выделения внеклеточных везикул (ВВ), секретируемых эукариотическими или прокариотическими клетками, в биологической жидкости.
7. Способ выделения внеклеточных везикул (ВВ), секретируемых эукариотическими или прокариотическими клетками в биологической жидкости, включающий добавление по каплям на поверхность биологической жидкости суспензии гранул с неподвижной фазой по любому из пп.1, 2, причем указанная суспензия находится в солевом растворе, забуференном при физиологическом рН,
инкубирование гранул в биологической жидкости и последующее разделение путем мягкого центрифугирования и декантации,
удаление ВВ с гранул путем инкубации, по меньшей мере, в равном объеме элюирующего раствора, который приготовлен перед использованием путем смешивания двух физиологических растворов с физиологическим рН, содержащих по меньшей мере два разных хелатирующих агента.
8. Способ по п.7, где хелатирующие агенты выбраны из группы, состоящей из ЭДТА и цитрата натрия.
9. Способ по п.7, где в конечном элюирующем растворе ЭДТА имеет концентрацию 3-6 мМ, а цитрат натрия имеет концентрацию 30-300 мкМ.
10. Способ по любому из пп.7-9, где инкубацию с элюирующим раствором поддерживают при круговом вращении при 20-37°С.
11. Способ по любому из пп.7-10, где биологическая жидкость выбрана из группы, состоящей из сред для культивирования клеток, физиологических буферных растворов, сред для бактериальных культур, крови человека и животных, экссудатов тканей человека и животных.
12. Способ, включающий подвергание ВВ, выделенных способом по любому из пп.7-11, протоколам для экстракции белка и нуклеиновых кислот из ВВ, технологиям обнаружения антигена в сочетании со специфическими антителами, детекции и количественному определению ассоциированных и/или содержащихся в везикулах нуклеиновых кислот с помощью ОТ-ПЦР, детекции и количественному определению ассоциированных и/или содержащихся в везикулах нуклеиновых кислот с помощью капельной цифровой ПЦР.
13. Набор для выделения внеклеточных везикул (ВВ), секретируемых эукариотическими или прокариотическими клетками, в биологической жидкости, включающий
контейнер, содержащий неподвижную фазу по любому из пп.1, 2, или
контейнер, содержащий нефункционализированную неподвижную фазу, состоящую из магнитных и немагнитных частиц микрометрового или нанометрового размера, при этом неподвижная фаза выбрана из группы, состоящей из гранул, изготовленных из агарозы, кремния, альгинатных солевых матриц, полимеров для металл-аффинной хроматографии с иммобилизованными ионами металлов (IMAC), никелевого хелатного акцептора, анионных или углеродных стирольных полимеров, и
контейнер, содержащий соль никеля или алюминия.
14. Набор для выделения внеклеточных везикул (ВВ), секретируемых эукариотическими или прокариотическими клетками, в биологической жидкости, включающий
контейнер, содержащий нефункционализированную неподвижную фазу, состоящую из магнитных и немагнитных частиц микрометрового или нанометрового размера; при этом неподвижная фаза выбрана из группы, состоящей из гранул, изготовленных из агарозы, кремния, альгинатных солевых матриц, полимеров для аффинной хроматографии с иммобилизованными ионами металлов (IMAC), никелевого хелатного акцептора, анионных или углеродных стирольных полимеров; и
контейнер, содержащий соль никеля или алюминия.
15. Набор по п.13 или 14, дополнительно включающий
контейнер, содержащий солевой буферный раствор с физиологическим значением рН,
по меньшей мере два контейнера, содержащих различные хелатирующие агенты.

---