Евразийский сервер публикаций

Евразийский патент на изобретение № 045394

   Библиографические данные

(11) Номер патентного документа

045394

(21) Номер евразийской заявки

202192652

(22) Дата подачи евразийской заявки

2020.03.24

(51) Индексы Международной патентной классификации

C40B 40/06 (2006.01)
C12N 15/10 (2006.01)
C12N 15/63 (2006.01)
C12P 19/34 (2006.01)

(43)(13) Дата публикации евразийской заявки, код вида документа

A1 2022.01.12 Бюллетень № 01  тит.лист, описание  последовательности 

(45)(13) Дата публикации евразийского патента, код вида документа

B1 2023.11.22 Бюллетень № 11  тит.лист, описание  последовательности 

(31) Номер заявки, на основании которой испрашивается приоритет

2019-069798

(32) Дата подачи заявки, на основании которой испрашивается приоритет

2019.04.01

(33) Код страны, идентифицирующий ведомство или организацию, которая присвоила номер заявки, на основании которой испрашивается приоритет

JP

(86) Номер и дата подачи международной заявки

JP2020/013133

(87) Номер и дата публикации международной заявки

2020/203496 2020.10.08

(71) Сведения о заявителе(ях)

НЭШНЛ ЮНИВЕРСИТИ КОРПОРЕЙШН КОБЕ ЮНИВЕРСИТИ (JP)

(72) Сведения об изобретателе(ях)

Цуге Кендзи, Исии Дзун, Кондо Акихико (JP)

(73) Сведения о патентовладельце(ах)

НЭШНЛ ЮНИВЕРСИТИ КОРПОРЕЙШН КОБЕ ЮНИВЕРСИТИ (JP)

(74) Сведения о представителе(ях)
или патентном поверенном

Медведев В.Н. (RU)

(54) Название изобретения

СПОСОБ КОНСТРУИРОВАНИЯ ХИМЕРНОЙ ПЛАЗМИДНОЙ БИБЛИОТЕКИ

   Формула  [ENG]
(57) 1. Способ получения фрагмента ДНК, причем фрагмент ДНК имеет по меньшей мере один элемент ДНК-вставки, содержащий: ДНК, содержащую ориджин репликации, эффективный в хозяине; и ДНК-вставку, в которой единичные ДНК связаны, отличающийся тем, что способ включает:
(А) обработку множества типов плазмид, содержащих элемент ДНК-вставки, в котором связано множество типов единичных ДНК, способных быть связанными в определенном порядке связывания, с использованием фермента рестрикции, пригодного для каждой плазмиды, для расщепления указанных плазмид на множество типов единичных ДНК и получения множества типов растворов со смесями единичных ДНК; и
(В) повторную сборку множества типов единичных ДНК способом OGAB с использованием множества типов растворов со смесями единичных ДНК, полученного на стадии (А), с получением фрагмента длинноцепочечной ДНК.
2. Способ по п.1, где указанный фрагмент ДНК представляет собой фрагмент ДНК для трансформации клетки.
3. Способ по п.2, где указанный ориджин репликации эффективен в микроорганизме-хозяине и указанный фрагмент ДНК для трансформации клетки предназначен для трансформации микробной клетки.
4. Способ по любому из пп.1-3, дополнительно включающий приготовление указанного множества типов плазмид перед стадией (А).
5. Способ по любому из пп.1-3, где указанное множество типов плазмид приготовлено способом OGAB.
6. Способ по любому из пп.1-3, отличающийся тем, что все соотношения между молярными концентрациями для фрагментов ДНК в указанном множестве типов растворов со смесями единичных ДНК, полученных на стадии (А), составляют от 0,8 до 1,2.
7. Способ по любому из пп.1-3, отличающийся тем, что в указанном множестве типов плазмид количество типов единичных ДНК, содержащихся в одном типе элемента ДНК-вставки, составляет от 3 до 60.
8. Способ по любому из пп.1-3, где количество типов ферментов рестрикции, используемых на стадии (А), составляет три или менее.
9. Способ по любому из пп.1-3, где фермент рестрикции представляет собой фермент рестрикции, который образует выступающий конец.
10. Плазмида, содержащая фрагмент ДНК, полученный способом по любому из пп. 1-3.
11. Способ получения фрагмента ДНК, причем фрагмент ДНК имеет по меньшей мере один элемент ДНК-вставки, содержащий: ДНК, содержащую ориджин репликации, эффективный в хозяине; и ДНК-вставку, в которой связаны единичные ДНК, отличающийся тем, что способ включает:
(А') приготовление множества типов плазмид, содержащих фрагмент ДНК, полученный способом по любому из пп.1-3;
(В') обработку множества типов плазмид, приготовленного на стадии (А'), ферментом рестрикции, пригодным для каждой плазмиды, для расщепления указанных плазмид на множество типов единичных ДНК и получения множества типов растворов со смесями единичных ДНК; и
(С) повторную сборку указанного множества типов единичных ДНК способом OGAB с использованием растворов со смесями единичных ДНК, полученных на стадии (В'), с получением фрагмента длинноцепочечной ДНК.
12. Способ по п.11, отличающийся селекцией множества типов плазмид, содержащих полученный фрагмент длинноцепочечной ДНК, и повторным применением плазмид в качестве плазмид на стадии (В').
13. Способ конструирования химерной плазмидной библиотеки, включающий использование способа по любому из пп.1-3.
14. Способ трансформации клеток, включающий трансформацию клетки фрагментом ДНК, полученным способом по любому из пп.1-3.
15. Композиция для трансформации клеток, содержащая фрагмент ДНК, полученный способом по любому из пп.1-3.
16. Способ трансформации клетки представляющим интерес фрагментом ДНК, где указанный фрагмент ДНК имеет по меньшей мере один элемент ДНК-вставки, включающий: ДНК, содержащую ориджин репликации, эффективный в указанной клетке в качестве хозяина; и ДНК-вставку, где указанная ДНК-вставка образована путем связывания множества типов единичных ДНК, способных быть связанными в определенном порядке связывания, где указанный способ включает
(A) обработку множества типов плазмид, содержащих элемент ДНК-вставки, с использованием фермента рестрикции, пригодного для каждой плазмиды, для расщепления указанных плазмид на множество типов единичных ДНК и получения множества типов растворов со смесями единичных ДНК;
(B) повторную сборку множества типов единичных ДНК способом OGAB с использованием множества типов растворов со смесями единичных ДНК, полученного на стадии (А), с получением фрагмента длинноцепочечной ДНК; и
(C) трансформацию указанной клетки указанным фрагментом длинноцепочечной ДНК.
17. Способ получения клетки, содержащей представляющий интерес фрагмент ДНК, где указанный фрагмент ДНК имеет по меньшей мере один элемент ДНК-вставки, включающий: ДНК, содержащую ориджин репликации, эффективный в указанной клетке в качестве хозяина; и ДНК-вставку, где указанная ДНК-вставка образована путем связывания множества типов единичных ДНК, способных быть связанными в определенном порядке связывания, где указанный способ включает
(А) обработку множества типов плазмид, содержащих элемент ДНК-вставки, с использованием фермента рестрикции, пригодного для каждой плазмиды, для расщепления указанных плазмид на множество типов единичных ДНК и получения множества типов растворов со смесями единичных ДНК;
(B) повторную сборку множества типов единичных ДНК способом OGAB с использованием множества типов растворов со смесями единичных ДНК, полученного на стадии (А), с получением фрагмента длинноцепочечной ДНК; и
(C) трансформацию указанной клетки указанным фрагментом длинноцепочечной ДНК.


 
Назад|  Новый поиск