Евразийский сервер публикаций
Евразийский патент на изобретение № 046241
Библиографические данные | ||||||||||||||||||||||||||||||||
| ||||||||||||||||||||||||||||||||
Формула [ENG] | ||||||||||||||||||||||||||||||||
(57) 1. Генетически модифицированная клетка, способная продуцировать один или несколько олигосахаридов грудного молока (ОГМ), где указанная клетка включает рекомбинантную нуклеиновую кислоту, кодирующую белок-транспортер суперсемейства major facilitator superfamily (MFS) с последовательностью SEQ ID NO: 1 или его функциональный гомолог, аминокислотная последовательность которого идентична по меньшей мере на 85% последовательности SEQ ID NO: 1.
2. Генетически модифицированная клетка по п.1, где олигосахарид выбирают из 2'-фукозиллактозы (2'-FL), 3'-фукозиллактозы (3-FL), дифукозиллактозы (DFL), 3'-сиалиллактозы (3'-SL), 6'-сиалиллактозы (6'-SL), лакто-N-триозы-2 (LNT-2), лакто-N-тетраозы (LNT), лакто-N-фукопентаозы I (LNFP-I), лакто-N-фукопентаозы II (LNFP-II), лакто-N-фукопентаозы III (LNFP-III), лакто-N-фукопентаозы IV (LNFP-IV) и лакто-N-фукопентаозы V (LNFP-V) и/или пара-лакто-N-неогексаозы (pLNnH). 3. Генетически модифицированная клетка по любому из предшествующих пунктов, где генетически модифицированная клетка представляет собой Escherichia coli. 4. Генетически модифицированная клетка по любому из предшествующих пунктов, где генетически модифицированная клетка дополнительно содержит по меньшей мере одну рекомбинантную нуклеиновую кислоту, которая кодирует функциональный фермент с гликозилтрансферазной активностью, выбранный из группы, состоящей из альфа-1,2-фукозилтрансферазы, альфа-1,3-фукозилтрансферазы, альфа-1,3/4-фукозилтрансферазы, альфа-1,4-фукозилтрансферазы, альфа-2,3-сиалилтрансферазы, альфа-2,6-сиалилтрансферазы, бета-l,3-N-ацетилглюкозаминилтрансферазы, бета-1,6-N-ацетилглюкозаминилтрансферазы, бета-1,3-галактозилтрансферазы и бета-1,4-галактозилтрансферазы. 5. Генетически модифицированная клетка по любому из предшествующих пунктов, где клетка дополнительно включает рекомбинантный регуляторный элемент, включающий последовательность нуклеиновой кислоты для регуляции экспрессии рекомбинантной нуклеиновой кислоты. 6. Генетически модифицированная клетка по п.5, где регуляторный элемент для регуляции экспрессии рекомбинантной нуклеиновой кислоты включает промоторную последовательность нуклеиновой кислоты, выбранную из lac-промотора или glp-промотора. 7. Конструкция нуклеиновой кислоты, включающая последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующую белок-транспортер суперсемейства major facilitator superfamily (MFS) с последовательностью SEQ ID NO: 1 или его функциональный гомолог, имеющий более чем 85% идентичности последовательности с последовательностью SEQ ID NO: 1, где последовательность нуклеиновой кислоты, кодирующая белок с последовательностью SEQ ID NO: 1, имеет по меньшей мере 85% идентичности последовательности с последовательностью SEQ ID NO: 2 и конструкция включает последовательность нуклеиновой кислоты, включающую регуляторный элемент. 8. Конструкция нуклеиновой кислоты по п.7, где регуляторный элемент регулирует экспрессию последовательности нуклеиновой кислоты, имеющей по меньшей мере 85% идентичности последовательности с последовательностью SEQ ID NO: 2. 9. Конструкция нуклеиновой кислоты по любому из пп.7, 8, где регуляторный элемент для регуляции экспрессии рекомбинантной нуклеиновой кислоты представляет собой элемент экспрессии, выбранный из lac-промотора или glp-промотора. 10. Конструкция нуклеиновой кислоты по п.7 или 8, где конструкция нуклеиновой кислоты является частью векторной ДНК или кассеты/картриджа экспрессии, интегрированных в геном клетки-хозяина. 11. Способ получения одного или нескольких олигосахаридов, включающий стадии: (i) обеспечения генетически модифицированной клетки, способной продуцировать ОГМ, по любому из пп.1-6; (ii) культивирование клетки в соответствии с (i) в подходящей среде для культивирования клеток для экспрессии указанной рекомбинантной нуклеиновой кислоты; (iii) сбор одного или нескольких ОГМ, полученных на стадии (ii). 12. Способ по п.11, где клетку культивируют в присутствии подходящего источника углерода, такого как глюкоза, глицерин и лактоза. 13. Применение генетически модифицированной клетки по любому из пп.1-6 или конструкции нуклеиновой кислоты по любому из пп.7-10 для получения одного или нескольких олигосахаридов грудного молока (ОГМ). 14. Применение по п.13, где ОГМ выбран из группы, состоящей из 2'-FL, 3-FL, DLF, LNT, LNT-II, LNnT, pLNnH и pLNH-II. 15. Применение по любому из пп.13 или 14, где ОГМ выбран из группы, состоящей из 2'-FL и 3-FL. Загрузка данных...
| ||||||||||||||||||||||||||||||||
Публикации документа | ||||||||||||||||||||||||||||||||
| ||||||||||||||||||||||||||||||||
Назад | | Новый поиск |