(57) 1. Фармацевтическая композиция, содержащая:
i) конструкцию на основе биспецифического одноцепочечного антитела, связывающуюся с поверхностным антигеном клетки-мишени посредством первого связывающего домена и с Т-клеточным поверхностным антигеном CD3 посредством второго связывающего домена, где конструкция на основе биспецифического антитела присутствует в концентрации в диапазоне от 50 мкг/мл до 20 мг/мл;
ii) по меньшей мере один консервант, выбранный из бензилового спирта, в концентрации, эффективной для подавления роста микроорганизмов, где по меньшей мере один консервант присутствует в концентрации от 0,11 до 0,9% вес./об., и
iii) разбавитель, где разбавитель представляет собой буфер, содержащий соль, выбранную из группы, состоящей из фосфата, ацетата, цитрата, сукцината и тартрата, и/или при этом буфер содержит гистидин, глицин, трис-глицин, трис или их смеси, в котором конструкция на основе биспецифического антитела демонстрирует уменьшение или предотвращение образования белковых агрегатов (виды с высокой молекулярной массой (HMW)) и где процентная концентрация HMW составляет менее 5%, и
при этом указанная композиция готова к использованию без необходимости добавления дополнительных вспомогательных веществ, выбранных из консервантов, стабилизаторов или поверхностно-активных веществ.
2. Фармацевтическая композиция по п.1, где конструкция на основе биспецифического антитела присутствует в концентрации в диапазоне, выбранном из группы, состоящей из:
(a) от 50 до 200 мкг/мл при pH от 6,5 до 7,5, или
(b) от 50 до 1000 мкг/мл при pH от 4,0 до 6,0, или
(c) от 50 мкг/мл до 2 мг/мл в присутствии средства, стабилизирующего CD3-связывающий домен цитрата, при pH от 4,0 до 7,5, или
(d) от 50 мкг/мл до 10 мг/мл, при pH от 4,0 до 7,5, где биспецифическое антитело содержит третий связывающий домен, который содержит два полипептидных мономера, каждый из которых содержит шарнирный участок, домен СН2 и СН3, при этом указанные два полипептидных мономера слиты друг с другом с помощью пептидного линкера, и при этом указанный третий связывающий домен содержит в порядке от амино- к карбоксильному концу:
шарнирный участок-СН2-СН3-линкер-шарнирный участок-СН2-СН3.
3. Фармацевтическая композиция по п.1, где разбавитель представляет собой буфер, выбранный из группы, состоящей из фосфата калия, уксусной кислоты/ацетата натрия, лимонной кислоты/цитрата натрия, янтарной кислоты/сукцината натрия, винной кислоты/тартрата натрия и гистидина/гистидина-HCl или их смесей.
4. Фармацевтическая композиция по п.1, где разбавитель представляет собой буфер, присутствующий в концентрации в диапазоне от 0,1 до 150 мМ.
5. Фармацевтическая композиция по п.1, где разбавитель представляет собой буфер, содержащий цитрат в концентрации в диапазоне от 0,25 до 50 мМ.
6. Фармацевтическая композиция по п.1, где pH композиции присутствует в диапазоне от 4,0 до 8,0.
7. Фармацевтическая композиция по п.1, где pH композиции присутствует в диапазоне pH от 4,0 до 5,0 или от 6,0 до 7,5.
8. Фармацевтическая композиция по п.1, где фармацевтическая композиция дополнительно содержит одно или несколько вспомогательных веществ, выбранных из группы, состоящей из сахарозы, трегалозы, маннита, сорбита, аргинина, лизина, полисорбата 20, полисорбата 80, полоксамера 188, плюроника и их комбинаций.
9. Фармацевтическая композиция по п.8, дополнительно содержащая полисорбат и/или лизин-HCL или где композиция не содержит полисорбат и/или лизин-HCL, если концентрация конструкции на основе биспецифического антитела составляет по меньшей мере 10, 15 или 20 мкг/мл.
10. Фармацевтическая композиция по п.1, где первый связывающий домен конструкции на основе биспецифического антитела связывается по меньшей мере с одним поверхностным антигеном клетки-мишени, выбранным из группы, состоящей из CD19, CD33, EGFRvIII, MSLN, CDH19, FLT3, DLL3, CDH3, ВСМА и PSMA.
11. Фармацевтическая композиция по п.1, где первый связывающий домен содержит VH-участок, содержащий CDR-H1, CDR-H2 и CDR-H3, и VL-участок, содержащий CDR-L1, CDR-L2 и CDR-L3, выбранные из группы, состоящей из:
(a) CDR-H1, приведенной в SEQ ID NO: 1, CDR-H2, приведенной в SEQ ID NO: 2, CDR-H3, приведенной в SEQ ID NO: 3, CDR-L1, приведенной в SEQ ID NO: 4, CDR-L2, приведенной в SEQ ID NO: 5, и CDR-L3, приведенной в SEQ ID NO: 6,
(b) CDR-H1, приведенного под SEQ ID NO: 29, CDR-H2, приведенной в SEQ ID NO: 30, CDR-H3, приведенной в SEQ ID NO: 31, CDR-L1, приведенной в SEQ ID NO: 34, CDR-L2, приведенной в SEQ ID NO: 35, и CDR-L3, приведенной в SEQ ID NO: 36,
(c) CDR-H1, приведенного под SEQ ID NO: 42, CDR-H2, приведенной в SEQ ID NO: 43, CDR-H3, приведенной в SEQ ID NO: 44, CDR-L1, приведенной в SEQ ID NO: 45, CDR-L2, приведенной в SEQ ID NO: 46, и CDR-L3, приведенной в SEQ ID NO: 47,
(d) CDR-H1, приведенного под SEQ ID NO: 53, CDR-H2, приведенной в SEQ ID NO: 54, CDR-H3, приведенной в SEQ ID NO: 55, CDR-L1, приведенной в SEQ ID NO: 56, CDR-L2, приведенной в SEQ ID NO: 57, и CDR-L3, приведенной в SEQ ID NO: 58,
(e) CDR-H1, приведенного под SEQ ID NO: 65, CDR-H2, приведенной в SEQ ID NO: 66, CDR-H3, приведенной в SEQ ID NO: 67, CDR-L1, приведенной в SEQ ID NO: 68, CDR-L2, приведенной в SEQ ID NO: 69, и CDR-L3, приведенной в SEQ ID NO: 70,
(f) CDR-H1, приведенного под SEQ ID NO: 83, CDR-H2, приведенной в SEQ ID NO: 84, CDR-H3, приведенной в SEQ ID NO: 85, CDR-L1, приведенной в SEQ ID NO: 86, CDR-L2, приведенной в SEQ ID NO: 87, и CDR-L3, приведенной в SEQ ID NO: 88,
(g) CDR-H1, приведенного под SEQ ID NO: 94, CDR-H2, приведенной в SEQ ID NO: 95, CDR-H3, приведенной в SEQ ID NO: 96, CDR-L1, приведенной в SEQ ID NO: 97, CDR-L2, приведенной в SEQ ID NO: 98, и CDR-L3, приведенной в SEQ ID NO: 99,
(h) CDR-H1, приведенного под SEQ ID NO: 105, CDR-H2, приведенной в SEQ ID NO: 106, CDR-H3, приведенной в SEQ ID NO: 107, CDR-L1, приведенной в SEQ ID NO: 109, CDR-L2, приведенной в SEQ ID NO: 110, и CDR-L3, приведенной в SEQ ID NO: 111,
(i) CDR-H1, приведенного под SEQ ID NO: 115, CDR-H2, приведенной в SEQ ID NO: 116, CDR-H3, приведенной в SEQ ID NO: 117, CDR-L1, приведенной в SEQ ID NO: 118, CDR-L2, приведенной в SEQ ID NO: 119, и CDR-L3, приведенной в SEQ ID NO: 120,
(j) CDR-H1, приведенного под SEQ ID NO: 126, CDR-H2, приведенной в SEQ ID NO: 127, CDR-H3, приведенной в SEQ ID NO: 128, CDR-L1, приведенной в SEQ ID NO: 129, CDR-L2, приведенной в SEQ ID NO: 130, и CDR-L3, приведенной в SEQ ID NO: 131,
(k) CDR-H1, приведенной в SEQ ID NO: 137, CDR-H2, приведенной в SEQ ID NO: 138, CDR-H3, приведенной в SEQ ID NO: 139, CDR-L1, приведенной в SEQ ID NO: 140, CDR-L2, приведенной в SEQ ID NO: 141, и CDR-L3, приведенной в SEQ ID NO: 142,
(l) CDR-H1, приведенной в SEQ ID NO: 152, CDR-H2, приведенной в SEQ ID NO: 153, CDR-H3, приведенной в SEQ ID NO: 154, CDR-L1, приведенной в SEQ ID NO: 155, CDR-L2, приведенной в SEQ ID NO: 156 и CDR-L3, приведенной в SEQ ID NO: 157, и
(m) CDR-H1, приведенной в SEQ ID NO: 167, CDR-H2, приведенной в SEQ ID NO: 168, CDR-H3, приведенной в SEQ ID NO: 169, CDR-L1, приведенной в SEQ ID NO: 170, CDR-L2, приведенной в SEQ ID NO: 171, и CDR-L3, приведенной в SEQ ID NO: 172;
12. Фармацевтическая композиция по п.1, где фармацевтическая композиция представляет собой жидкость.
13. Фармацевтическая композиция по п.1, где композиция содержит <5% мультимеров конструкции на основе биспецифического антитела.
14. Фармацевтическая композиция по п.13, где мультимеры представляют собой димеры.
15. Фармацевтическая композиция по п.1, где фармацевтическая композиция содержит полисорбат 80.
16. Фармацевтическая композиция по п.13, где фармацевтическая композиция содержит по меньшей мере 0,25 мМ цитрата, по меньшей мере 0,0125 мМ лизина и/или по меньшей мере 0,001% полисорбата 80 при pH от 6,5 до 7,5.
17. Фармацевтическая композиция по п.16, где композиция содержит биспецифическое антитело, содержащее третий связывающий домен, который содержит два полипептидных мономера, каждый из которых содержит шарнирный участок, домен СН2 и СН3, при этом указанные два полипептидных мономера слиты друг с другом с помощью пептидного линкера, и при этом указанный третий связывающий домен содержит в порядке от амино- к карбоксильному концу:
шарнирный участок-СН2-СН3-линкер-шарнирный участок-СН2-СН3.
18. Фармацевтическая композиция по п.1, где композиция предоставлена в виде лиофилизата для хранения.
19. Применение фармацевтической композиции по п.1 для лечения злокачественного заболевания.
20. Применение фармацевтической композиции по п.19, которая вводится внутривенно непрерывно в течение 1-24 ч.
21. Применение фармацевтической композиции по п.19, которая вводится внутривенно непрерывно в течение 2-14 дней.

---